进口c18色谱柱在不同ph环境下的选择对于传统c18色谱柱,ph值使用范围通常为2-7,因为ph值高于8时c18固定相会受到限制。由于残余硅羟基的存在,易对碱性化合物造成不可逆吸附,造成峰拖尾,影响分离与分析。ph值太低则会使键合的烷基脱落,而且对成分的分离达不到要求。
c18色谱柱不同ph环境下的选择:
1.酸性条件
为改善c18色谱柱在低ph值时的稳定性,有人提出了空间位阻方法。空间位阻作用是指连接较大基团,立体阻碍溶质基团进攻硅醇基,使硅氧烷能够再生,提高了化学键合固定相抗水解的能力。还有人制备了侧链中含有异丙基或异丁基的c18化学键合固定相。该固定相由于引入了较大的侧链基团,立体阻碍了残留硅醇基与溶质之间的相互作用,在低ph值条件下能够保持稳定,这种化学键合固定相更适合酸性物质的分离。
一种c18色谱柱使用空间位阻技术,其使用单官能团硅烷,具有较大的二异丁基(sb-c18)侧链基团,空间位阻关键的硅氧烷键合到硅胶表面,以避免在低ph值条件下水解破坏,在酸性流动相条件下提供良好的稳定性和重现性。因此,该c18色谱柱成为低ph值方法开发的首要选择。
2.碱性条件
制造快速分离碱性化合物的化学键合相一直是研究热点。双齿键合固定相的每个硅烷化分子中含有两个硅原子,两个硅原子之间以-o-或-ch2-ch2等基团连接,每个硅原子含有1个c18官能团。它的环状结构无论在低ph值条件下,还是高ph值条件下均显示了较高的稳定性和满意的柱效。与传统的单齿化学键合相相比,这种化学键合固定相突出的优点是在低、中、高ph值时都有很好的稳定性。使用c18双齿化学键合固定相的c18色谱柱其耐受ph值达11.5,特别适合在高ph值的流动相条件下对强碱性化合物进行有效的色谱分离。在开发普鲁卡因有关物质的药物分析方法中,对比8种c18色谱柱,终选择了耐受ph值范围较大的c18色谱柱。
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进口C18色谱柱在不同pH环境下的选择
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