小鼠蛋白激酶B(PKB)elisa检测试剂盒操作要点

一、小鼠蛋白激酶b(pkb)elisa检测试剂盒试剂准备：
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oc)，试剂不能直接在37oc溶解。
2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/ml。准备7个稀释标准品的ep管，每个ep管中加入150μl的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度，标准品稀释液(0pg/ml)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液：用580ml蒸馏水或去离子水将20ml浓洗涤液稀释至600ml，进行30倍稀释。
二、小鼠蛋白激酶b(pkb)elisa检测试剂盒操作要点:
1）标本的采取和保存：可用作elisa测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分elisa检测均以血清为标本；
2）试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
3）加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
4）保温：elisa中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
5）洗涤：洗涤的方式除某些elisa仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6）显色和比色：显色是elisa中的后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7）结果判断：分定性判定和定量判定。
关键词：酶标仪比色仪