单克隆分离深受广大客户的好评 单克隆分离采用的是集流式细胞术和微流控技术于一体的新一代细胞分离技术。流式细胞仪的流体聚焦技术能够*地提高检测灵敏度,另外微流控技术使得设备内部的鞘液压力可以降至2psi以下,也无需高频振荡,减少了分选过程对细胞的伤害,大大提高了分选出来的细胞的活性,适用脆弱细胞的分离。另外,一次性芯片真正实现了细胞分选过程中,样本之间的*隔离(从加样到分离全都在芯片中完成)。
“单克隆分离头”利用聚丙稀导入头细长柔韧无断裂且导通的特性,将试剂、糊剂等材料直接送入细长多弯深孔处,有通过此分离头将细胞分离,进行克隆培养。应用于医疗、环保、生化、测试等领域。
离子交换是温和条件下分离蛋白质混合物的一个有用的技术,常见的是应用增加盐浓度的缓梯度溶液进行洗脱。ph梯度洗脱使用频率较低(除专属应用外,例如色谱聚焦),并且需要复杂的缓冲液体系。尽管如此,单克隆分离能够利用常规缓冲盐实现ph梯度洗脱,在分离单克隆抗体带电异构体时的优势。
单克隆分离方法:
a、在培养皿中制备饲养细胞(小鼠腹腔细胞)单层。
b、临用前将2.0%琼脂糖生理盐水溶液与等量双倍浓度的ht培养液混匀,配成1%琼脂糖培养液,45℃水浴中温育。
c、吸去平皿上层培养液,加入1%琼脂糖培养液3ml,室温10分钟。
d、取杂交瘤细胞悬液1ml,加入1%琼脂糖培养液1ml混匀,铺于上层。
e、37℃、7.5%湿润培养7-14天;克隆生长至2mm时,用毛细吸管吸出克隆,直接转种于含有饲养细胞的24孔板,扩大培养。
f、吸取上清,检测抗体,阳性孔可继续克隆化,或扩大培养、冻存。
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