卵泡抑制素elisa试剂盒 elisa检测试剂盒引起 elisa 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点,试剂因素、标本因素和操作因素。试剂因素:●1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。 2.不同厂家的试剂一定不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如:有的厂家酶标板孔间 cv 值大于 20%,标记酶的活性及显色液的稳定性比较差,使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。 3. 要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,选择刚出厂的试剂盒为宜。 4. 避免选择假的 elisa 试剂盒。有些厂家为夸大生产 elisa 的指标范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。标本因素和操作因素:● 血清是常用的 elisa 标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种。 内源性物质:有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。外源性物质:外源性物质常常是由于用于 elisa测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和*中添加物等影响。
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●elisa试剂盒17个操作技巧●: 1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。 3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。 4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。 5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。 6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。 7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人igg工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人igg工作液。 8.elisa试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。 9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/l次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。 10.人elisa试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。 11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是后加底物溶液及2n h2so4。测量时先用此孔调od值至零。 12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑l中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。 13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。 14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。 15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。 16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人elisa试剂盒吸取的量不够准确。 17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
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编辑:小檀20181010
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