实验分析—elisa知识要点显色和比色分析
实验分析—elisa知识要点显色和比色分析
显色
显色是elisa中的后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时间一般不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色适当缩短或延长反应时间，及时判断。
opd(邻苯二胺)底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值增高。opd底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。opd产物用硫酸终止后，显色由橙黄色转向棕黄色。
tmb(四甲基联苯胺)受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应观察结果。elisa试剂盒但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。tmb经hrp作用后，约40分钟显色达，随即逐渐减弱，至2小时后即可*消退至无色。tmb的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠(sds)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
比色
比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。在加底物液显色前，先将软板边缘剪净，这样，此板就可*平妥坐入座架中。
比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔(未经任何反应仅加底物液的孔)和空白孔(以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔)，以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。
比色结果的表达以往通用光密度(oplical density，od)，现按规定用吸光度(absorbence，a)，两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于a字母的右下角，如opd的吸收波长为492nm，表示方法为“a492nm”或“od492nm”。
酶标比色仪
酶标比色仪简称酶标仪，通常指于测读elisa结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的a值为1.083，则该孔相对于空气的真实a值应为1.083± 0.01(1.073～1.093)，重复测定数次，其a值均应1.083±0.05(1.078～1.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000～2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的a值常以“*”或“over”或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000～2.900，而其线性范围仅0.000～2.000，这在定量elisa中制作标准曲线时应予注意。
酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15-30℃，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。
测读a值时，要选用产物的敏感吸收峰，如opd用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，次在适波长(w1)，第二次在不敏感波长(w2)，两次测定间不移动elisa板的位置。例如opd用492nm为w1，630nm为w2，终测得的a值为两者之差(w1-w2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
各种酶标仪性能有所不同，使用中应详细阅读elisa试剂盒说明书
elisa 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。
东莞到平武县专线物流[直达运输]_东莞到绵阳平武县物流专线公司
专业中山古镇到武汉新洲区物流公司,优质中山古镇到新洲区物流专线
慈溪到商洛物流专线运输_优质慈溪到商洛物流公司
福州到厦门同安区物流公司货运直达,福州到同安区物流专线
湖州到尼木县专线物流公司_湖州到拉萨尼木县直达物流专线
实验分析—elisa知识要点显色和比色分析
南平到青岛市北区物流专线直达运输_南平到市北区物流公司
福州到厦门同安区物流专线+高效快捷_福州到同安区物流货运专线
苏州到巴里坤直达物流专线,苏州到新疆巴里坤专线物流直达
过氧化氢喷雾消毒机 消杀病毒防疫病
常州金坛区到蓝田县专线物流公司,常州金坛区到西安蓝田县物流公司专线货运
泉州到赞皇货运专线_专业泉州到石家庄赞皇专线物流公司
昆山到深圳盐田区物流专线「直达」_昆山到盐田区物流公司专线直达
BC-110行车及船舶声光报警器主要功能及特点
长沙到依兰县物流专线直达货运_长沙到哈尔滨依兰县物流公司
优质东莞大朗镇到宾阳县物流公司,专业东莞大朗镇到广西宾阳县物流专线
东莞厚街镇到北京大兴区物流专线直达_专业东莞厚街镇到大兴区物流公司
使用甲烷检测仪的注意事项
启东到无锡惠山区专线物流公司_启东到惠山区专线货运公司
嘉兴到理县货运专线物流直达_嘉兴到阿坝理县物流公司
显色
显色是elisa中的后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时间一般不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色适当缩短或延长反应时间，及时判断。
opd(邻苯二胺)底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值增高。opd底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。opd产物用硫酸终止后，显色由橙黄色转向棕黄色。
tmb(四甲基联苯胺)受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应观察结果。elisa试剂盒但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。tmb经hrp作用后，约40分钟显色达，随即逐渐减弱，至2小时后即可*消退至无色。tmb的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠(sds)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
比色
比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。在加底物液显色前，先将软板边缘剪净，这样，此板就可*平妥坐入座架中。
比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔(未经任何反应仅加底物液的孔)和空白孔(以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔)，以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。
比色结果的表达以往通用光密度(oplical density，od)，现按规定用吸光度(absorbence，a)，两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于a字母的右下角，如opd的吸收波长为492nm，表示方法为“a492nm”或“od492nm”。
酶标比色仪
酶标比色仪简称酶标仪，通常指于测读elisa结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可到0.001，准确性为±1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的a值为1.083，则该孔相对于空气的真实a值应为1.083± 0.01(1.073～1.093)，重复测定数次，其a值均应1.083±0.05(1.078～1.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000～2.000，新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的a值常以“*”或“over”或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000～2.900，而其线性范围仅0.000～2.000，这在定量elisa中制作标准曲线时应予注意。
酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15-30℃，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。
测读a值时，要选用产物的敏感吸收峰，如opd用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，次在适波长(w1)，第二次在不敏感波长(w2)，两次测定间不移动elisa板的位置。例如opd用492nm为w1，630nm为w2，终测得的a值为两者之差(w1-w2)。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
各种酶标仪性能有所不同，使用中应详细阅读elisa试剂盒说明书
elisa 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。
东莞到平武县专线物流[直达运输]_东莞到绵阳平武县物流专线公司
专业中山古镇到武汉新洲区物流公司,优质中山古镇到新洲区物流专线
慈溪到商洛物流专线运输_优质慈溪到商洛物流公司
福州到厦门同安区物流公司货运直达,福州到同安区物流专线
湖州到尼木县专线物流公司_湖州到拉萨尼木县直达物流专线
实验分析—elisa知识要点显色和比色分析
南平到青岛市北区物流专线直达运输_南平到市北区物流公司
福州到厦门同安区物流专线+高效快捷_福州到同安区物流货运专线
苏州到巴里坤直达物流专线,苏州到新疆巴里坤专线物流直达
过氧化氢喷雾消毒机 消杀病毒防疫病
常州金坛区到蓝田县专线物流公司,常州金坛区到西安蓝田县物流公司专线货运
泉州到赞皇货运专线_专业泉州到石家庄赞皇专线物流公司
昆山到深圳盐田区物流专线「直达」_昆山到盐田区物流公司专线直达
BC-110行车及船舶声光报警器主要功能及特点
长沙到依兰县物流专线直达货运_长沙到哈尔滨依兰县物流公司
优质东莞大朗镇到宾阳县物流公司,专业东莞大朗镇到广西宾阳县物流专线
东莞厚街镇到北京大兴区物流专线直达_专业东莞厚街镇到大兴区物流公司
使用甲烷检测仪的注意事项
启东到无锡惠山区专线物流公司_启东到惠山区专线货运公司
嘉兴到理县货运专线物流直达_嘉兴到阿坝理县物流公司