人elisa酶联免疫试剂盒出现问题相关知识

1、问:做间接人elisa酶联免疫试剂盒法测试小鼠血清中的ige抗体,设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等,用的是*标记的羊抗鼠ige抗体,和亲和素的辣根过氧化物酶。可是结果除了空白对照孔没有颜色外,其余各孔全有颜色,而且od值都相差不大,为什么?
回答:可能原因如下:
(1) 水质被金属离子等污染;防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。
(2) 洗涤不充分,样品中其它成分残留或酶残留;防止办法洗涤液应注满微孔,充分洗涤。
(3) 移液头重复使用,未洗净或消毒不*; 防止办法移液头一次性使用。
(4) 酶标板灵敏度过高。
(5) 一抗显色时间的控制等等,关于elisa的每一步都要注意才行。
2、elisa试剂盒加样时的防错小经验
(1)用一张写满字的纸,字越多越好,比如报纸,垫在下面,这样,加过标本的小孔看过去下面的字会变小,没加的字正常,非常容易区分。
(2)可以利用液面反光与没有加的孔加以区别
(3)在标本加完后,再把加样枪全压下,使液面产生小气泡,也可以加以区分

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