本标准规定了用液相色谱仪测定饲料中免疫球蛋白igg含量的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、含igg的饲料原料(包括血浆等)中免疫球蛋白igg的测定。zui低检出限为5μg(取样1g,zui低检出浓度为5mg/kg)。
原理:饲料中免疫球蛋白igg的测定液相色谱法是根据亲和色谱的原理,在磷酸盐缓冲盐条件下免疫球蛋白igg与配基相连,在ph2.5的盐酸*条件下洗脱免疫球蛋白igg。
试剂:
磷酸二氢钾 ,*, igg标准液,流动相a(ph6.5,0.05mol/l磷酸盐缓冲液),流动相b(ph2.5,0.05mol/l*盐酸缓冲液),
仪器:
液相色谱仪(具紫外检测器和梯度洗脱装置).色谱工作站, 进样阀,实验室常用仪器设备,ph计 ,匀浆机 ,超纯水装置。
色谱条件:
色谱柱:pharmacia hi-trap protein g柱,1ml
波长:280nm
进样量:20ul
流动相:流动相a=ph6.5 0.05mol/l磷酸盐缓冲液 流动相b=ph2.5 0.05mol/min*盐缓冲液
时间 流速ml/min 流动相a% 流动相b%
0-4.5 0.5 100 0
4.5-15.0 0.5 0 100
15.0-26.0 0.5 100 0
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饲料中免疫球蛋白IgG的测定液相色谱法
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