化妆品中尿素含量的测定 酶催化法
gb/t 29661-2013 化妆品中尿素含量的测定 酶催化法
范围
本标准规定了化妆品中尿素含量的测定方法一一酶催化法。
本标准适用于化妆品中尿素的定量测定，其定量下限为0.025%。
原理
样品在偏酸性条件下，所含尿素被尿素酶分解为铵盐，用酸滴定，由此计算尿素含量。
试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯. 水为 gb/t 6682 规定的三级水。
尿素酶: 0.5g以下可将0.25g尿素于40°c~45°c在1h内*分解。按照产品说明保存。
0.1mol/l盐酸: 配置方法按 gb/t 601。
0.1mol/l naoh溶液:称取0.40g naoh固体，溶于100ml水中。
无水乙醇。
塑料薄膜。
分析步骤
试样制备
水剂类、乳液类、膏霜类(o/w)样品
称取均匀样品0.5g(至0.01g)于高脚烧杯中，加入50ml水，用塑料薄膜封口，超声提取20min。
将高型烧杯放在磁力搅拌器上，边搅拌边滴加盐酸中和至ph4.0(用ph计，不计量，若溶液呈ph<4.0，则需滴加naoh溶液到ph>4.0，再用盐酸中和至ph4.0)，加入0.2g粉碎较细的尿素酶立即用塑料薄膜封口，置于50°c水浴中不时的摇晃，30min后取出冷却至室温，边搅拌边用0.1mol/l的盐酸滴定至ph4.0，记录消耗的0.1mol/l盐酸标准溶液的体积v1，同时做一空白试验，记录消耗的0.1mol/l盐酸标准溶液的体积v0。
膏霜类(w/o)、油溶性样品
称取均匀样品0.5g(至0.01g)于15ml离心管中，加10ml无水乙醇，超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40ml水，摇匀。
余下步骤与水剂类、乳液类、膏霜类(o/w)样品相同。
唇膏类将品
称取均匀样品0.5g(至0.01g)于15ml离心管中，加10ml无水乙醇，在80°c水浴中加热3min~5min使唇膏融化，涡旋1min，超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40ml水，摇匀。
余下步骤与水剂类、乳液类、膏霜类(o/w)样品相同。
平行试验
按上述步骤，对同一样品进行平行实验测定。
结果计算
按式(1)计算尿素含量，以%表示:
式中:
60.06一一尿素的相对分子质量；
v1一一样品消耗0.1mol/l盐酸标准溶液的体积，单位为毫升(ml)；
v0一一空白试验消耗0.1mol/l盐酸标准溶液的体积，单位为毫升(ml)；
c 一一0.1mol/l盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/l)；
m 一一试验样品质量，单位为克(g)。
计算结果保留至小数点后1位。
注: 若检测尿素含量超过20%，需要以减少样品称样量的方式重新醇进行测定。
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范围
本标准规定了化妆品中尿素含量的测定方法一一酶催化法。
本标准适用于化妆品中尿素的定量测定，其定量下限为0.025%。
原理
样品在偏酸性条件下，所含尿素被尿素酶分解为铵盐，用酸滴定，由此计算尿素含量。
试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯. 水为 gb/t 6682 规定的三级水。
尿素酶: 0.5g以下可将0.25g尿素于40°c~45°c在1h内*分解。按照产品说明保存。
0.1mol/l盐酸: 配置方法按 gb/t 601。
0.1mol/l naoh溶液:称取0.40g naoh固体，溶于100ml水中。
无水乙醇。
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分析步骤
试样制备
水剂类、乳液类、膏霜类(o/w)样品
称取均匀样品0.5g(至0.01g)于高脚烧杯中，加入50ml水，用塑料薄膜封口，超声提取20min。
将高型烧杯放在磁力搅拌器上，边搅拌边滴加盐酸中和至ph4.0(用ph计，不计量，若溶液呈ph<4.0，则需滴加naoh溶液到ph>4.0，再用盐酸中和至ph4.0)，加入0.2g粉碎较细的尿素酶立即用塑料薄膜封口，置于50°c水浴中不时的摇晃，30min后取出冷却至室温，边搅拌边用0.1mol/l的盐酸滴定至ph4.0，记录消耗的0.1mol/l盐酸标准溶液的体积v1，同时做一空白试验，记录消耗的0.1mol/l盐酸标准溶液的体积v0。
膏霜类(w/o)、油溶性样品
称取均匀样品0.5g(至0.01g)于15ml离心管中，加10ml无水乙醇，超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40ml水，摇匀。
余下步骤与水剂类、乳液类、膏霜类(o/w)样品相同。
唇膏类将品
称取均匀样品0.5g(至0.01g)于15ml离心管中，加10ml无水乙醇，在80°c水浴中加热3min~5min使唇膏融化，涡旋1min，超声提取20min。以不低于5000r/min离心15min，将上清液全部转移至高型烧杯中，再加入40ml水，摇匀。
余下步骤与水剂类、乳液类、膏霜类(o/w)样品相同。
平行试验
按上述步骤，对同一样品进行平行实验测定。
结果计算
按式(1)计算尿素含量，以%表示:
式中:
60.06一一尿素的相对分子质量；
v1一一样品消耗0.1mol/l盐酸标准溶液的体积，单位为毫升(ml)；
v0一一空白试验消耗0.1mol/l盐酸标准溶液的体积，单位为毫升(ml)；
c 一一0.1mol/l盐酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/l)；
m 一一试验样品质量，单位为克(g)。
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注: 若检测尿素含量超过20%，需要以减少样品称样量的方式重新醇进行测定。
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