须毛癣菌LAMP试剂盒实验要点

须毛癣菌lamp试剂盒实验要点:
1.ctab 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,dna—ctab 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的dna 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使dna 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到dna. —ctab 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能*抑制rna 酶的活性,而且酚可以溶解含poly(a)的mrna。如果用ben酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(ben酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pbs 的dh5α菌种接种在lb 固体培养基(含50μg/ml amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml lb 液体培养基(含50μg/ml amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒dna 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得dna 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需rnawait用量。rnawait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml rnawait);离心收集2×106细胞rnawait的用量是1ml。
2. 将rnawait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即*浸入rnawait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则rnawait不能有效渗入,组织中间部位的rna不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入rnawait。
4. 保存时先将样本浸入rnawait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使rnawait*渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(rnawait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从rnawait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在rnawait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响rna的质量。
重组人 ccl14 / hcc-1 / hcc-3 蛋白 (his 标签)
重组人 ccl21 / 6ckine 蛋白
重组人 cxcl9 / mig / c-x-c motif chemokine 9 蛋白
重组小鼠 cxcl9 / mig / c-x-c motif chemokine 9 蛋白
重组食蟹猴 cxcl12 / sdf-1 蛋白 (fc 标签)
重组人 cxcl1 / mgsa / nap-3 蛋白 (his & nusa 标签)
重组食蟹猴 cxcl13 / bca-1 / blc 蛋白 (his 标签)
重组小鼠 ccl6 / c-c motif ligand 6 蛋白 (his 标签)
重组小鼠 ccl8 / mcp-2 蛋白 (his & nusa 标签)
重组人 ccl17 / tarc / scya17 蛋白
重组人 ccl15 / mip-5 / mip-1 delta 蛋白 (aa 22-113, his 标签)
重组小鼠 cxcl2 / gro2 / mip-2 蛋白 (his & sumo 标签)
重组人 ccl17 / tarc / scya17 蛋白 (his 标签)
重组人 cxcl1 / mgsa / nap-3 蛋白 (his & sumo 标签)
重组人 ccl8 / mcp-2 蛋白 (sumo 标签)
重组人 mcp-3 / ccl7 蛋白 (his 标签)
重组小鼠 cxcl16 / sr-psox 蛋白 (his 标签)
重组人 ccl5 / rantes 蛋白 (his & mucin 标签)
重组人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 6-77)
重组人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 6-77, fc 标签)
重组人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 1-77)
重组人 il-8 / cxcl8 蛋白 (aa 1-77, fc 标签)
重组人 cxcl4 / pf4 蛋白
重组人 cxcl12 / sdf1b 蛋白 (fc 标签)

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