大鼠小肠粘膜上皮细胞细胞培养操作规程
大鼠小肠粘膜上皮细胞细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备rpmi-1640培养基(rpmi-1640：gibco，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%dmso，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4ml培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1ml培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000rpm，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
saos-2，人成骨肉瘤细胞
caco-2，人结直肠腺癌细胞
nci-n87 [n87]人胃癌细胞
mgc80-3（mgc-803）人胃癌细胞
ec109，人食管癌细胞
hgc-27人胃癌细胞
ags人胃腺癌细胞
u251人胶质瘤细胞
thp-1人单核白血病细胞
huh-7人肝癌细胞
rbe, 人肝胆管癌细胞
miapaca-2, 人胰腺癌细胞
km3, 人多发性骨髓瘤细胞
qgy-7701, 人肝癌细胞
panc-1, 人胰腺癌细胞
u266b1 [u266], 人多发性骨髓瘤细胞
hep g2, 人肝癌细胞系
pc-12(高分化)，pc12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)
gh3, 大鼠垂体生长激素腺瘤
hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞
qbc-939, 人胆管癌细胞
b16-f10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞
sgc-7901, 人胃腺癌细胞系
sk-n-sh, 人神经母细胞瘤细胞
sk-mel-1, 人皮肤黑色素瘤细胞
a549, 人肺癌细胞系
a-375 [a375], 人恶性黑素瘤细胞株
a549/ddp, 人肺腺癌耐药细胞株
关键词：培养箱
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2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%dmso，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4ml培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1ml培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000rpm，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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gh3, 大鼠垂体生长激素腺瘤
hepa 1-6, 小鼠肝癌细胞
qbc-939, 人胆管癌细胞
b16-f10, 小鼠黑色素瘤高转移细胞
sgc-7901, 人胃腺癌细胞系
sk-n-sh, 人神经母细胞瘤细胞
sk-mel-1, 人皮肤黑色素瘤细胞
a549, 人肺癌细胞系
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