离子对试剂知多少？
哈喽，相信有实验经验的小伙伴，对于“离子对试剂”这个名词并不陌生，因为在我们日常检测中会经常出现它们的身影，它们也实实在在帮助我们在日常检测中，解决了很多棘手的问题。下面小编就简单带大家认识下这位日常检测帮助良多的“大功臣”。
01
原理
使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时，样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留，这时要加入相应的离子对试剂，将分析物上的离子进行结合，形成在柱子上有保留的分子。
02
离子对试剂种类
离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大的影响。离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质。
●被分离溶质是强酸或强碱，离子对试剂可以是强酸或强碱，弱碱或弱酸。
●被分离的溶质是弱酸或弱碱，则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸。
●对于溶质结构性质相差较大的混合样品，离子对试剂种类的选择并没有特殊要求。
●离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果。
1.用于酸性化合物：四丁基氢氧化铵（10%水溶液） 、四丁基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵。
2.用于碱性化合物：戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠 、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠。
3.其他离子对试剂：高氯酸钠、三氟yi酸、七氟丁酸等。
常用离子对试剂 cas号：
1-戊烷磺酸钠cas:22767-49-3
1-己烷磺酸钠cas:2832-45-3
1-庚烷磺酸钠cas:22767-50-6
1-辛烷磺酸钠cas:5324-84-5
1-癸烷磺酸钠 cas:13419-61-9
03
离子对试剂选用步骤
1．选择一根适合的色谱柱，常为c18柱。
2．准备流动相时仅使用hplc级别的水和色谱级试剂。
3．选择能给出最佳分离度的流动相成分和浓度。
4．如果样品中有非离子化物质，在尝试离子化分离之前首先优化分离情况。
5．选择合适的离子对系列试剂以提供相应的离子配对：对于酸性分析物使用酸性离子对试剂；对于碱性分析物使用碱性离子对试剂。
6．通过比较选择所得分离度zui 好的离子对试剂。
7．一旦离子对试剂已经确定，调节流动相的ph值将分离度zui大化；因为微小的ph值改变对保留性质和选择性都有较大的影响，所以仔细的小幅度调节ph值。
8．理想状况下，流动相中的离子对试剂浓度应为0.005m，但是稍微增加离子对试剂可能会稍微增加保留性质并因此优化分离情况。
优点
1．缓冲液制备简单。
2．使用反相色谱柱，碳链长度选择众多，可用于增加保留时间、改善分离性质。
3．即使使用较大离子，也能得到清晰的峰形且保持结果高度重现性。
4．分离时间缩短（与离子交换相比）。
5．适用于复杂混合物的分离（不同于离子抑制法）。
6．能够同时分离离子化和非离子化的分析物。
7．有效改善峰形。
缺点
1．对色谱柱伤害较大。离子对试剂会对色谱柱造成不可逆的伤害，离子对试剂和固定相结合产生不可逆吸附，进而影响固定相活性位点。比如十八烷基硅胶键合色谱柱，这种反应对色谱柱影响很大，而且离子对试剂很难从色谱柱上冲洗干净，会大大缩短色谱柱的使用寿命。
2．实验条件不稳定。离子对试剂的浓度与其样品的保留时间有直接的影响，而且离子对试剂对ph值比较敏感，配制流动相时要求精确度较高。否则直接影响实验的重复性和重现性。
3．用离子对试剂的实验色谱柱平衡时间较长，一般都建议小流速过夜平衡。
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01
原理
使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时，样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留，这时要加入相应的离子对试剂，将分析物上的离子进行结合，形成在柱子上有保留的分子。
02
离子对试剂种类
离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大的影响。离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质。
●被分离溶质是强酸或强碱，离子对试剂可以是强酸或强碱，弱碱或弱酸。
●被分离的溶质是弱酸或弱碱，则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸。
●对于溶质结构性质相差较大的混合样品，离子对试剂种类的选择并没有特殊要求。
●离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果。
1.用于酸性化合物：四丁基氢氧化铵（10%水溶液） 、四丁基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵。
2.用于碱性化合物：戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠 、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠。
3.其他离子对试剂：高氯酸钠、三氟yi酸、七氟丁酸等。
常用离子对试剂 cas号：
1-戊烷磺酸钠cas:22767-49-3
1-己烷磺酸钠cas:2832-45-3
1-庚烷磺酸钠cas:22767-50-6
1-辛烷磺酸钠cas:5324-84-5
1-癸烷磺酸钠 cas:13419-61-9
03
离子对试剂选用步骤
1．选择一根适合的色谱柱，常为c18柱。
2．准备流动相时仅使用hplc级别的水和色谱级试剂。
3．选择能给出最佳分离度的流动相成分和浓度。
4．如果样品中有非离子化物质，在尝试离子化分离之前首先优化分离情况。
5．选择合适的离子对系列试剂以提供相应的离子配对：对于酸性分析物使用酸性离子对试剂；对于碱性分析物使用碱性离子对试剂。
6．通过比较选择所得分离度zui 好的离子对试剂。
7．一旦离子对试剂已经确定，调节流动相的ph值将分离度zui大化；因为微小的ph值改变对保留性质和选择性都有较大的影响，所以仔细的小幅度调节ph值。
8．理想状况下，流动相中的离子对试剂浓度应为0.005m，但是稍微增加离子对试剂可能会稍微增加保留性质并因此优化分离情况。
优点
1．缓冲液制备简单。
2．使用反相色谱柱，碳链长度选择众多，可用于增加保留时间、改善分离性质。
3．即使使用较大离子，也能得到清晰的峰形且保持结果高度重现性。
4．分离时间缩短（与离子交换相比）。
5．适用于复杂混合物的分离（不同于离子抑制法）。
6．能够同时分离离子化和非离子化的分析物。
7．有效改善峰形。
缺点
1．对色谱柱伤害较大。离子对试剂会对色谱柱造成不可逆的伤害，离子对试剂和固定相结合产生不可逆吸附，进而影响固定相活性位点。比如十八烷基硅胶键合色谱柱，这种反应对色谱柱影响很大，而且离子对试剂很难从色谱柱上冲洗干净，会大大缩短色谱柱的使用寿命。
2．实验条件不稳定。离子对试剂的浓度与其样品的保留时间有直接的影响，而且离子对试剂对ph值比较敏感，配制流动相时要求精确度较高。否则直接影响实验的重复性和重现性。
3．用离子对试剂的实验色谱柱平衡时间较长，一般都建议小流速过夜平衡。
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