immobilon-ny+ 带正电尼龙转印膜和immobilon-nc 转印膜millipore 提供了一种用于核酸应用转印膜选择。 使用带正电的 immobilon-ny+ 转印膜可以在 southern blotting,northern blotting 和 colony/plaque lifts 实验中获得出色的结果。 immobilon-nc 转印膜,是主要的 southern 和 colony/plaque 实验方案中zui初使用的膜,也可作为一种灵敏度较低但更经济的选择。
immobilon-ny+ 带正电尼龙转印膜immobilon-ny+ 是一种带正电的尼龙转印膜,非常适合于可靠与可重现的转移、固定、杂交及随后的重复杂交实验。 其表面均一分布的正电荷密度确保得到zui高的灵敏度和zui低的背景信号。 此膜经强化处理具有超长的耐久性,这一点对于重复杂交试验至关重要。
可提供详细的实验方案,在使用 immobilon-ny+ 转印膜时可用于优化转印结果。
灵敏度zui高,而背景信号zui小
非常出色的重复杂交特性
在化学发光法和放射性检测系统中均表现出色
性能southern blotting
直接比较三种带正电尼龙膜在各自优化实验方案下的表现:每种膜在其推荐的紫外波长照射下交联。 immobilon-ny+ 转印膜的杂交信号是其它两种膜的 2 倍。
12 次重复杂交之后的信号强度
尼龙膜在 254nm 交联,并进行了多次重复杂交,依次为:用 32p 标记探针做 2 次杂交,4 次模拟杂交,用 32p 标记探针做第 7 次杂交,然后进行 5 次模拟杂交以及用 32p 标记探针做第 13 次杂交。 在每个杂交周期之间,将膜置于 0.4m naoh 溶液中,在 45°c 下洗提 30 分钟。 模拟杂交与真实杂交*一样,区别在于未加 32p 标记探针。 在整个重复杂交过程中,immobilon-ny+ 的信号强度是竞争产品 a 和 b 的两倍。
检测灵敏度
将凝胶上 dna 的量减少到 0.01ng。 0.1 lane(条带)中的 2.2 和 2.0kbp 带分别与 dna 的 0.48 和 0.42pg 相对应。 大约相当于 10µg 人类基因组 dna 中一个单拷贝基因序列。 可通过对探针浓度加倍来提高灵敏度。 在 0.01ng 条带中,与竞争产品 a 相比,immobilon-ny+ 转印膜灵敏度稍高,而背景信号更低。
用化学发光检测进行 northern blotting
鼠肝的全部 rna (1µg) 在甲醛琼脂糖凝胶中电泳分离,然后通过毛细作用转印到 immobilon-ny+ 转印膜和竞争产品带正电尼龙膜 “a”。 与烘焙相比,通过紫外交联固定rna 能增强信号。 immobilon-ny+ 转印膜比竞争产品 a 表现出更高的灵敏度。
colony lifts
将载有 puc19 或 plh2(2.0kbp λ 噬菌体 dna hindiii 片段克隆至 puc19)的 jm109 混合细菌悬浮液置于琼脂培养皿中,在 37°c 下培养过夜。 将培养皿在 4°c 下冷却30 分钟,将菌落(直径大约 1– 2mm)转印至一片 82mm 直径的 immobilon-ny+ 圆片膜上,或转印至竞争产品带正电的尼龙膜上。 膜上的 dna 在 254 nm, 60,000µjoules/cm2 紫外光照射下交联。 然后用 a 32p 标记的 dna 探针对膜进行杂交,并使用磷屏成像系统显色。
immobilon-nc 转印膜immobilon-nc 转印膜是一种经济型选择,用于核酸和蛋白质印迹实验方案。 这种转印膜是 southern、colony/plaque 以及蛋白质实验方案中zui初使用的膜。 nc hatf 所含的混合纤维素酯基质,不含在细胞生长过程中会干扰细胞壁完整性的表面活性剂。 这些膜用于 colony lifts。 nc hahy 所含的混合纤维素酯基质,所带的表面活性剂能够增强可湿性以及转印过程中的处理能力。 两种膜对核酸和蛋白质都具有高吸附容量。 适用于常规转印。
订购信息:
immobilon-ny+ 转印膜 – 圆片滤膜
比较 目录编号 滤膜直径,mm 数量/包装
inyc08250 82 50
inyc08550 85 50
inyc13250 132 50
inyc13750 137 50
immobilon-nc 不含表面活性剂的转印膜 – 圆片滤膜
比较 目录编号 滤膜直径,mm 数量/包装
hatf08250 82 50
hatf08550 85 50
hatf13250 132 50
hatf13750 137 50
immobilon-nc 转印膜 – 圆片滤膜
目录编号 滤膜直径,mm 数量/包装
hahy08250 82 50
hahy08550 85 50
hahy13750 137 50
immobilon-ny+ 转印膜 – 片和卷
比较 目录编号 滤膜尺寸,cm x cm 数量/包装
inyc61150 6 x 11 50
inyc09120 9 x 12 10
inyc10100 10 x 10 10
inyc15150 15 x 15 10
inyc20200 20 x 20 10
inyc22220 22.2 x 22.2 10
inyc2222c 22.2 x 22.2 100
inyc26260 26 x 26 10
inyc00010 30 x 330 1
immobilon-nc 转印膜 – 片和卷
比较 目录编号 滤膜尺寸,cm x cm 数量/包装
hahy304f0 30 x 30 10
hatf00010 33 x 300 1
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Northern 和 Southern Blotting,以及 Colony 和 Plaque Lifts
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