球场兴奋剂【莱克多巴胺】的高效液相HPLC检测方案
2018年俄罗斯*已尘埃落定，法国队时隔20年后再次捧起了大力神杯。本次俄罗斯*赛场精彩纷呈，让*的球迷们大饱眼福。
可能大家都没在意，每一场球赛的顺利进行，都离不开检测人员的努力。参加本届*的736名球员，都至少接受过一次药检，总共超过2700次药检，所有样本结果都正常，没有出现阳性结果。
比赛场上备受关注的兴奋剂，您对它了解有多少呢？它是如何被准确无误地被检测出来的？
【莱克多巴胺】
莱克多巴胺是兴奋剂的一种，兴奋剂在英语中称“dope”，是社会对禁用药物的一个习惯性统称，兴奋剂并不都具有兴奋性（如利尿剂），甚至有的还具有抑制性（如β-阻断剂）。奥委会已经规定的属于兴奋剂的部分药品有：氯三苯乙烯、、皮质类固醇、蛋白合成类固醇、诺龙、促红细胞生成素、睾丸素、支气管扩张剂、蛋白合成激素、诺龙等。使用兴奋剂，将对人的生理、心理产生极大的危害，使服用者心力衰竭、激动狂躁，成年女性男性化，男子过早秃顶，前列腺炎，前列腺肥大，患糖尿病，心脏病等，严重损害人的身心健康。
曾经，西马特罗、特布他林、克伦特罗、*、莱克多巴胺、多巴胺6种β-兴奋剂，一度被广泛应用于动物养殖中，现在新的规定则禁止所有的β-兴奋剂药物在动物养殖中使用。目前，在肉类市场上，商品猪生产者为了高效率地生产出瘦肉率高、质量好的猪肉来跟其他的动物产品竞争，兴奋剂的使用仍有存在。采用液相色谱法检测动物组织中莱克多巴胺的含量，不仅成本低，而且操作简便、精密度高、检出限低、回收率高、重现性较好。
【样品的制备】
取试样5~10g至50ml聚丙烯离心管中,加入4g *(600 ℃烘2h)和10ml 乙酸乙酯-正丁醇混合液涡动提取15s ,超声提取10min,2500r/min离心5min ,用10ml乙酸乙酯-正丁醇混合液重复提取1次,合并乙酸乙酯-正丁醇层于50ml鸡心瓶中,加入异丙醇 5ml,在(70±5)℃下旋转蒸干。用0.04mol/l盐酸溶液3ml分3次溶解鸡心瓶中的残渣,转移至10ml离心管中(上层沉淀可用脱脂棉过滤除去),30000r/ min离心5min,取上清液过sls小柱(依次用5ml水、5ml 甲醇、5ml 0.04mol/l 盐酸溶液预处理),保持流速为1ml/ min, 然后依次用5ml水、5ml甲醇淋洗小柱,真空抽干,用10ml4 %氨/甲醇溶液洗脱 ,收集洗脱液,在(50±5)℃下用氮气流吹干。用2%乙酸溶液定容到1ml,过0.45μm 微孔滤膜,供液相测定。
【标准曲线的绘制】
精密称取莱克多巴胺对照品25mg ,置100ml容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,作为莱克多巴胺储备液。精密量取莱克多巴胺储备液200ul，置10ml 容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,得莱克多巴胺工作液。分别准确吸取一定量的标准工作液,用流动相溶液稀释，定容,配制成浓度分别为2.5、5、10、15、25ng/ ml 的标准溶液，分别进行hplc检测。
【色谱条件】
检测器：荧光检测。 激发波长:226nm，发射波长:305nm,
色谱柱：c18 色谱柱(4. 6m ×250 mm ,5μm)
流动相：流动相为戊烷磺酸钠溶液[取800ml水,加20ml冰醋酸和0.87g戊烷磺酸钠(c5h11o3sna·h2o)混匀]∶乙腈(78∶22,v/v)
流速：1. 0ml/ min
进样量：20μl
柱温：30℃
【谱图】
【药品检测仪器配置】
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【莱克多巴胺】
莱克多巴胺是兴奋剂的一种，兴奋剂在英语中称“dope”，是社会对禁用药物的一个习惯性统称，兴奋剂并不都具有兴奋性（如利尿剂），甚至有的还具有抑制性（如β-阻断剂）。奥委会已经规定的属于兴奋剂的部分药品有：氯三苯乙烯、、皮质类固醇、蛋白合成类固醇、诺龙、促红细胞生成素、睾丸素、支气管扩张剂、蛋白合成激素、诺龙等。使用兴奋剂，将对人的生理、心理产生极大的危害，使服用者心力衰竭、激动狂躁，成年女性男性化，男子过早秃顶，前列腺炎，前列腺肥大，患糖尿病，心脏病等，严重损害人的身心健康。
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【样品的制备】
取试样5~10g至50ml聚丙烯离心管中,加入4g *(600 ℃烘2h)和10ml 乙酸乙酯-正丁醇混合液涡动提取15s ,超声提取10min,2500r/min离心5min ,用10ml乙酸乙酯-正丁醇混合液重复提取1次,合并乙酸乙酯-正丁醇层于50ml鸡心瓶中,加入异丙醇 5ml,在(70±5)℃下旋转蒸干。用0.04mol/l盐酸溶液3ml分3次溶解鸡心瓶中的残渣,转移至10ml离心管中(上层沉淀可用脱脂棉过滤除去),30000r/ min离心5min,取上清液过sls小柱(依次用5ml水、5ml 甲醇、5ml 0.04mol/l 盐酸溶液预处理),保持流速为1ml/ min, 然后依次用5ml水、5ml甲醇淋洗小柱,真空抽干,用10ml4 %氨/甲醇溶液洗脱 ,收集洗脱液,在(50±5)℃下用氮气流吹干。用2%乙酸溶液定容到1ml,过0.45μm 微孔滤膜,供液相测定。
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检测器：荧光检测。 激发波长:226nm，发射波长:305nm,
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