鲲霆生物|异常峰型排查及解决之拖尾峰（耗材篇）
日常液相分析中，异常峰型是困扰实验人员的难题之一。上期我们就肩峰的处理进行了介绍，本期我们将会对拖尾峰的排查与解决进行讨论。
异常峰形排查及解决之肩峰(点击查看)
首先，我们先要对拖尾峰进行了解，
那么具体什么样的峰型可以称为拖尾峰呢？
2020版中国药典四部0512高效液相色谱法对拖尾因子（t）有所定义。
当以峰高作定量参数时，除另有规定外，t值应在0.95~1.05之间。以峰面积作定量参数时，一般的峰拖尾或前伸不会影响峰面积积分，但严重拖尾会影响基线和色谱峰起止的判断和峰面积积分的准确性，此时应在品种正文项下对拖尾因子作出规定。这时我们发现，2020版中国药典对于拖尾峰有两种情况，一种为峰高定量，另一种为峰面积定量，各有不同解释。
药典内容
—节选自2020版中国药典二部抑制肽
(图片来源网络）
国家药典委对于2025版中国药典0512高效液相色谱法修订草案也已公示，其中明确规定了拖尾因子的范围。原文如下：除另有规定外，在检查和含量测定项下，以峰面积作定量参数时，t值应在0.8～1.8之间；以峰高作定量参数时， t值应在0.95～1.05之间。以峰面积作定量参数时，一般的峰拖尾或前伸不会影响峰面积积分，但严重拖尾会影响基线和色谱峰起止的判断和峰面积积分的准确性，此时应在品种正文项下对拖尾因子予以规定。(图片来源网络）
那么当我们发现日常分析中拖尾因子
不符合药典规定时该如何处理呢？
我们可以按照以下原因进行排查。
流动相及试剂
① 流动相ph
当流动相ph处于化合物pka附近时可能会出现化合物处于离子态与分子态共同出现的情况，此时可能出现拖尾现象。可以考虑将流动相ph调整至化合物pka±2的范围以避免此类现象。
② 进样溶剂
当进样溶剂洗脱强度强于初始比例流动相时，可能出现溶剂效应。拖尾峰是溶剂效应的现象之一。可以考虑使用初始比例流动相作为进样溶剂，或使用溶剂效应消除器。
hplc分析中溶剂效应成因及解决方案(点击查看)
样品问题
①杂质
样品中混有杂质干扰化合物峰型，导致出现峰拖尾情况。可以考虑前处理中对杂质进行去除，或是调整分析方法分离杂质。
②样品过载
样品进样量过高导致过载时也可能产生拖尾情况。可以考虑降低进样量，或对样品适当稀释。
色谱柱
①封端不充分
封端不充分或不封端的色谱柱，在分析碱性化合物时常会发生拖尾现象，其原因是样品与色谱柱硅胶颗粒表面上的酸性或离子化硅羟基之间发生相互作用导致拖尾。此时可以考虑更换为封端更为完善的色谱柱或者是添加扫尾剂三乙胺等添加剂优化峰型。
②筛板堵塞
当色谱柱筛板堵塞时可能会出现拖尾现象，主要是因为化合物无法同时穿过筛板，出现了前后不同的通过时间，导致谱峰扩散拖尾。可以考虑进行色谱柱冲洗以及加装固体颗粒物过滤部件。。
③柱效降低
当色谱柱长时间使用后，色谱柱柱效逐渐下降是拖尾发生的原因之一。可以考虑进行色谱柱冲洗或更换新柱。
液相色谱柱冲洗与维护(点击查看)
关于我们 | 鲲霆生物
上海鲲霆生物科技有限公司深耕生物医药行业多年，自创立之初就以为生物医药企业提供从研发分析到工业生产的整体化服务为愿景。不断钻研色谱分析及制备技术，提升服务品质，致力于成为值得信赖的色谱技术服务提供商。
鲲霆生物现为nouryon旗下品牌 kromasil液相色谱柱及制备填料中国区总代理。主营业务为代理销售各类实验室精密仪器、试剂耗材以及相关领域的技术开发与咨询服务。
鲲霆生物愿与您携手同行，共同前进，为更健康，更安全的生物医药而不懈努力。
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流动相及试剂
① 流动相ph
当流动相ph处于化合物pka附近时可能会出现化合物处于离子态与分子态共同出现的情况，此时可能出现拖尾现象。可以考虑将流动相ph调整至化合物pka±2的范围以避免此类现象。
② 进样溶剂
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①杂质
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②样品过载
样品进样量过高导致过载时也可能产生拖尾情况。可以考虑降低进样量，或对样品适当稀释。
色谱柱
①封端不充分
封端不充分或不封端的色谱柱，在分析碱性化合物时常会发生拖尾现象，其原因是样品与色谱柱硅胶颗粒表面上的酸性或离子化硅羟基之间发生相互作用导致拖尾。此时可以考虑更换为封端更为完善的色谱柱或者是添加扫尾剂三乙胺等添加剂优化峰型。
②筛板堵塞
当色谱柱筛板堵塞时可能会出现拖尾现象，主要是因为化合物无法同时穿过筛板，出现了前后不同的通过时间，导致谱峰扩散拖尾。可以考虑进行色谱柱冲洗以及加装固体颗粒物过滤部件。。
③柱效降低
当色谱柱长时间使用后，色谱柱柱效逐渐下降是拖尾发生的原因之一。可以考虑进行色谱柱冲洗或更换新柱。
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