Trizol法提取RNA的注意事项与常见问题有哪些？
trizol法是目前普遍使用的rna提取方法，那么trizol法提取rna有哪些注意事项和常见问题呢？让我们一起来看看吧！
一、trizol法提取rna的注意事项
在使用trizol的时候要带手套和眼罩，避免接触到皮肤和衣服，使用化学通风橱，防止蒸汽吸入。
从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取rna时可加入少许糖原以促进rna沉淀。例如加800ml trizol匀浆样品，沉淀rna前加5-10μg rnase-free糖原。糖原会与rna一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响pcr反应。
匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。rna沉淀可以保存于75%酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
分层和rna沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
预期产量：1mg组织或1×106细胞提取rna分别为：
肝和脾6-10μg ,肾3-4μg ,骨骼肌和脑组织1-1.5μg ,胎盘1-4μg ,上皮细胞8-15μg ,成纤维细胞5-7μg。
二、trizol法提取rna的常见问题
1. 得率低
（1）样品裂解或匀浆处理不che底
（2）rna沉淀未wan全溶解
2. od260/od280<1 .65
（1）检测吸光度时，rna样品没有溶于水，而溶于了te中
（2）样品匀浆时加的试剂量太少
（3）匀浆样品时未在室温放置5分钟
（4）吸取水相时混入了有机相
（5）rna沉淀未wan全溶解。
3. rna降解
（1）组织取出后没有马上处理或冷冻
（2）待提取rna的样品没有保存于-60至-70℃,而保存在了-5至-20℃
（3）细胞在用胰酶处理时过度
（4）溶液或离心管未经rnase去除处理
（5）电泳时使用的甲醛ph值低于了3.5
更多有关trizol法提取rna的注意事项与常见问题，请联系天津益元利康生物科技有限公司：
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在使用trizol的时候要带手套和眼罩，避免接触到皮肤和衣服，使用化学通风橱，防止蒸汽吸入。
从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取rna时可加入少许糖原以促进rna沉淀。例如加800ml trizol匀浆样品，沉淀rna前加5-10μg rnase-free糖原。糖原会与rna一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响pcr反应。
匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。rna沉淀可以保存于75%酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
分层和rna沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
预期产量：1mg组织或1×106细胞提取rna分别为：
肝和脾6-10μg ,肾3-4μg ,骨骼肌和脑组织1-1.5μg ,胎盘1-4μg ,上皮细胞8-15μg ,成纤维细胞5-7μg。
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1. 得率低
（1）样品裂解或匀浆处理不che底
（2）rna沉淀未wan全溶解
2. od260/od280<1 .65
（1）检测吸光度时，rna样品没有溶于水，而溶于了te中
（2）样品匀浆时加的试剂量太少
（3）匀浆样品时未在室温放置5分钟
（4）吸取水相时混入了有机相
（5）rna沉淀未wan全溶解。
3. rna降解
（1）组织取出后没有马上处理或冷冻
（2）待提取rna的样品没有保存于-60至-70℃,而保存在了-5至-20℃
（3）细胞在用胰酶处理时过度
（4）溶液或离心管未经rnase去除处理
（5）电泳时使用的甲醛ph值低于了3.5
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