广谱型DNA免核酸提取试剂盒产品操作介绍

试剂盒应用
本试剂盒中采用配方,能够快速的裂解各种常见样本,无需反复离心,通过裂解和吸附获得高质量的基因组dna。该dna 无需进行纯化可以直接用于pcr、荧光定量pcr、lamp、str等扩增。
nusmart® dna lysis 可用于血样、唾液、腹水、细胞、组织、拭子、dna 病毒、大肠杆菌、农杆菌、葡萄球菌、环境样本(例如擦拭物、水样本、鞋底)、支原体、衣原体以及植物等样品中基因组dna的提取。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等域。
试剂盒组成
保存条件
4ºc 保存。使用将nusmart® dna lysis 充分混匀。
需要准备
金属恒温浴、离心机
使用方法
一、不同样品的处理方法
1. 组织液的处理
(1)组织液包括组织研磨液、细胞悬液、血清、血液、唾液、尿液、精液、拭子处理液※等。取10 μl组织液置于离心管中。
※:棉签放入500μl生理盐水或无菌水中,浸泡5-10min,用力挤压后取10 μl置于离心管中。
(2)加入20 μl dna lysis。
(3)充分混匀。
(4)置于55ºc 加热5 分钟。溶液即为dna 模板。
2. 组织块的处理
(1)用眼科剪剪取1-2mm 组织块,并将组织块剪成肉泥状。
(2)加入20 μl dna lysis。
(3)充分混匀。
(4)置于55ºc 加热5分钟。
(5)10,000rpm 离心2-3 分钟,取上清。上清即为dna 模板。
3. 其他样本的处理
(1)菌类包括大肠杆菌、农杆菌、葡萄球菌等。取20 μl dna lysis 放置在离心管中。
(2)用接种针/无菌牙签挑取菌斑或10μl 培养溶液放入(1)中。
(3)充分混匀。
(4)置于55ºc 加热5 分钟。溶液即为dna 模板。
4. dna 病毒的处理
(1)细胞培养液参考“组织液的处理”。
(2)组织样本参考“组织块的处理”。
5. 植物样本的处理
(1)叶片参考“组织块的处理”。
(2)种子需磨碎后参考“组织块的处理”。
二、推荐pcr 反应体系
注意事项
一、试剂盒使用注意事项
(1)所有试剂按照温度储存。
(2)实验后务必对操作区进行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材需使用商品化的无酶耗材。
(3)dna lysis 采用利配方,若出现肉眼可见小球状物质属于正常现象。
二、试剂盒使用过程中注意事项
(1)pcr 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。
(2)整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中,减少环境污染。
三、试剂盒使用后注意事项
(1)dna lysis 处理后的dna 模板可在-20℃保存至少1 个月。避免反复冻融,防止基因组断裂。
(2)pcr 反应完成后,严禁在实验区开盖。在污染区进行琼脂糖电泳,以防止气溶胶污染。
(3)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。
检测实例
来源 范围
细胞 293t、a549、vero、pk15、sp2/0、hct-116、marc145、st、siha、mcf-7
人 头发、唾液、咽拭子、全血
小鼠 心、肝、脾、肺、肾、脑、脊柱、胃、大肠、小肠、胆囊、尾巴、脚趾、皮、耳朵、肌肉、edat 抗凝血、肝素钠抗凝血、枸橼酸钠抗凝血
猪 心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、精液、全血、血清
鸡 胃、肝、心、肺、脾
病毒 asfv、prv、ppv、pcv
细菌 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、农杆菌、结核杆菌
真菌 酵母菌、白木耳、灵芝
植物 烟草、拟南芥、油菜、水稻、大豆、玉米、小麦、棉花、百脉根、西红柿、土豆、茄子、胡萝卜、龙眼、荔枝、苹果、香蕉、葡萄、铁皮石斛、丹参、益母草、红花、紫草、苦参、艾叶
亚洲 鲫鱼鱼鳍、鱼泡、鱼鳞、鱼籽
其他物种 支原体、衣原体

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