紫外可见分光光度计,是用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。一般分为单光束和双光束两类。
单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。
双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
至于单双光束的紫外可见分光光度计各有什么优缺点,简单对比如下:
1、单光束uv:传统的紫外,单光源发射单光束,全程密闭,通过光栅,照射样品,最后由光电倍增管监测器检测。
缺点:测完空白再测试样品,全波段分析时间较长(一般2min)。
2、比例双光束uv:单光源单光束,全程密闭,通过光栅,加入棱镜,把光分为两束,分别照射样品与空白,再合并光,进入光电倍增管检测器,通过差减法计算结果。
好处:空白样品同时检测。
缺点:灵敏度下降,全波段分析时间较长。
3、双光束uv:单光源单光束,全程密闭,通过棱镜分出两道光,分别通过一光栅,分别进入各自的光点倍增管检测器。
好处:加强灵敏度,同时测量空白与样品。
缺点:全波段分析时间较长。
4、全波段uv:单光源单光束,样品与空白暴露在空气中,照射样品,开始进入密闭箱,通过光栅,进入dad检测器。
好处:空白只需要检测一次,如果你愿意一辈子检测这一次都可以。检测样品不密闭,外界光线对其无影响,使用方便且精确。分析任何波段或全波段不到1s。
缺点:贵。
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