支原体*

支原体检测的核酸法，已广泛应用于细胞支原体筛查和生物制品企业的生产放行检测中。
但在使用pcr方法检测支原体之前，由于有些待检样品的成分过于复杂，或含有的某些成分会抑制pcr反应的进行，因此需要使用『支原体*』提前做dna的提取工作。
对于生物药或需遵循药典的样本，也由于样品基质可能会影响检测的灵敏度，因此需要样本做dna抽提处理，实现核酸法gao的灵敏度。
这里向您*德国mb公司生产的支原体*
英文品名：
venor®gem sample preparation kit
该试剂盒已经过多方广泛验证，有很多引用文献；
它已达到欧洲药典标准，可用于pcr或qpcr检测支原体的方法学验证。
1
产品信息：
2
产品特点
1）符合欧洲药典的要求。
2）采用离心管柱的方法，全程只需30分钟。
2）从细胞上清和生物制品中，均可分离支原体dna。
3）洗脱dna纯度高，体积50μl，保证pcr大的灵敏度。
3
操作步骤
四步法：
1）细胞裂解
2）dna吸附到核酸纯化柱上
3）去除残留污染物和抑制剂
4）dna洗脱
试剂盒组分：
spin columns（核酸纯化住）
collection tubes（收集管）
conditioner液
binding buffer液
buffer a1液
buffer a2液
buffer e液
操作示意图：
4
所需其他材料及仪器：
＞96%无水乙醇ep管（1.5ml或2ml）离心机和恒温仪（用于1.5ml 或2ml 离心管）移液器及带滤芯吸头（100μl 和1000μl）可选：蛋白酶k（货号56-0002），用于处理富含蛋白（＞10mg/ml）的样品。可选：dna 内控对照，用于配合venor®gem classic kit（货号11-1025）
以保证操作过程没有问题。
5
注意事项：
1. 支原体dna 提取试剂盒一次可从多含有1x 106细胞/ml 的细胞上清中直接分离dna。
2. 富含蛋白的样本（蛋白含量＞10mg/ml）可能需要蛋白酶k 处理后，再抽提dna。
3. 此试剂盒不适于提取真核细胞组织的dna。
4. 若在提取dna时加入了内控dna对照，则在支原体核酸法检测时不需要再加内控对照。我们*使用对照，以验证结果的可靠性，也有助于排除故障。
5. 不要使用其他酒精来替代乙醇，它将导致核酸产量的下降。
6. 缓冲液e（buffer e）的预热，会显著改善核酸的产量。