lonza cocoon® platform 作为高灵活性,全封闭全自动化细胞治疗生产平台,目前已经在全球范围内布局130台,并有两个项目进入临床ii期,助力细胞治疗产业化快速发展。
目前cocoon® platform已经推出cocoon® platform 2.0并整合了磁分选模块,进一步加强了cocoon®的全自动化流程。今天lonza将为大家详细介绍cocoon®二代magsep 磁选protocol的使用指南。
01
安装调试
·房间需求:eu gmp grade b/c,19℃-22℃
· 场地环境:高度约1.5米操作台,长0.8米,宽1.2米,承重60kg,台面光滑水平(cocoon®需进行水平校准)
· 电力需求:100-240 vac,50/60hz,6 amp(ups电源最佳)
· 气体准备:co2,终端管路cpc 5/32 i.d. x 1/4 o.d.
· 网络接入
02
试剂耗材
03
工艺流程以及要点
day0 细胞分选激活
包含步骤:
·cocoon®外:pbmc分离,磁珠孵育
·cocoon®内:培养基添加,细胞分选,细胞激活培养
初始进入细胞请使用纯净的已进行磁珠孵育的pbmc,如使用手动人工分离的pbmc,可于培养瓶中培养24h去除贴壁杂志细胞后方可进入cocoon®培养。
请按照磁珠供应商推荐的工艺进行磁珠孵育,强烈推荐磁珠细胞比例为1:1,过多的磁珠会导致细胞的过度激活以及后期磁珠残留的增加。
day1 细胞转导
包含步骤:ph校准;病毒转导
cocoon®可以根据ph来自动调整舱体内co2的浓度,同时可以根据培养体系内的溶解氧和ph来自动调整灌流速率来满足不同客户的需求。
day2 病毒去除
包含步骤:病毒去除
培养室全换液以进行病毒去除。
day3-8 细胞培养
包含步骤:细胞培养;磁珠去除
分别于day4,day7进行第一次以及第二次磁珠去除,强烈建议于day4进行第一次磁珠去除,过度的细胞激活会影响t细胞的亚群以及影响t细胞在cocoon®培养室中的增殖。
day9 细胞收获
包含步骤:
·cocoon®内:磁珠去除,细胞收获
·cocoon®外:细胞洗涤,细胞冻存
于day9进行细胞收获,进行第三次磁珠去除并进行洗涤收获。
cocoon®可以进行洗涤,但是cocoon®本身耗材不耐受dmso,因此如需要在cocoon®内进行细胞洗涤分装,请使用不含有dmso的冻存液。
04
应用案例
目前已有中国广州以及新西兰客户使用cocoon®进行了tlr2 car t cells的临床研究。
car结构如下:
与手工生产数据相比,cocoon®在病人和健康人间展现了更稳定的阳性率:
同时,相较于手工工艺cocoon®展现了更加稳定的细胞产量和纯度:
最后相较手工工艺也展现了类似的cd4/8细胞亚群:
一代cocoon®与二代cocoon®在细胞扩增以及细胞活率方面没有明显差距:
cocoon® platform具有高度灵活性,能顺利地帮客户进行手工工艺的转移和放大生产工作,助力全球细胞治疗产业发展。
[参考文献]
cell & gene therapy insights 2022; 8(1), 97–112
doi: 10.18609/cgti.2022.027
magnetic selection for consistent cellular starting material in autologous cell therapy manufacture
上海到晋州物流专线_上海到晋州物流公司_上海至晋州专线
青岛到绍兴柯桥区专线物流直达货运_青岛到柯桥物流专线公司
南京到象山货运专线「返程车」_南京到宁波象山物流公司
石狮到常州回程车货运专线_石狮到常州物流公司
义乌到重庆荣昌区物流专线回程车货运,义乌到荣昌区专线物流公司
Cocoon® Magsep 磁分选工艺使用指南与客户案例分享
日照到太原专线物流运输_日照到太原物流专线公司
宁乡到重庆大足区货运专线返程配货_宁乡到大足区物流公司
武汉到肥西货运公司,武汉到安徽肥西物流专线直达货车
漳州到舒城专线物流公司_漳州到六安舒城物流专线[直达运输]
西安到珠海斗门区专线物流公司,西安到斗门区物流公司回程车
南通到太仓整车物流货运专线_南通到太仓物流公司
上海到温州物流专线直达货运_上海到温州物流公司
龙港到宁洱县货运专线物流_专业龙港到普洱宁洱县货运公司
广州荔湾区到宽城货运专线直达,广州荔湾区到承德宽城物流专线公司
泰州到中山板芙镇物流专线直达运输_泰州到板芙物流公司
宁波镇海区到杭州滨江区专线物流公司_宁波镇海区到滨江区物流公司专线货运
永嘉到禄劝物流公司专线直达,永嘉到云南禄劝物流专线
宁波镇海区到宿迁货运专线_优质宁波镇海区到宿迁物流专线公司
上海松江区到浏阳物流专线,上海松江区到浏阳物流公司直达