凯氏定氮仪测定小米中蛋白质含量
前言
小米，原名：粟，也称作粱、狗尾草、黄粟、粟米。蛋白质含量在不同类型的小米中变动很大，一般介于5%—20%之间，平均为10%—12%。小米中蛋白质的质量常优于小麦、稻米和玉米，但是必需氨基酸中的赖氨酸含量低。现在我们根据《gb 5009.5-2016 食品安全标准 食品中蛋白质的测定》对小麦中的蛋白质进行测定。
实验部分
1.1实验原理
小米中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏，使氨析出，用硼酸吸收后，再以盐酸或硫酸标准滴定液进行滴定。
1. 2 仪器与设备
k1160 全自动凯氏定氮仪
sh 420f 石墨消解仪
1. 3 试剂与耗材
实验中涉及到的试剂，均为优级纯或分析纯；实验用水为无氨蒸馏水。
1.3.1盐酸或硫酸溶液：c(h+)= 0 . 1mol /l ，标准滴定液。
1. 3 . 2 硼酸溶液：质量分数 2% 。
1. 3. 3 氢氧化钠溶液：质量分数 40% 。
1. 3. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂：将溴甲
酚绿乙醇溶液(1g/ l) 与甲基红乙醇溶液(1g/ l) 按 5 ： 1 体积比临时混合摇匀备用。
1. 3 . 5 催化剂片： 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片
1. 4实验过程
1 . 4 . 1 取样
将小米研磨后，准确称量0.5g 的样品（精确至 0 . 1mg ），加催化剂一片（或硫酸钾5g 与硫酸铜 0 . 5g) ，再沿瓶壁滴加硫酸 8.5ml。
1 . 4 .2 消解
利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，设定消解温度参数如下表：
消化完毕后，将消化管取下冷却。
1 . 4 . 3 上机测试
待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上，开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下：
式中：m-标准酸摩尔浓度（mol/l)
w-样品质量（g）
v0-空白样滴定标准酸消耗量（ml）
v-样品滴定标准酸消耗量（ml）
5.83-样品蛋白系数
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1. 3 试剂与耗材
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1.3.1盐酸或硫酸溶液：c(h+)= 0 . 1mol /l ，标准滴定液。
1. 3 . 2 硼酸溶液：质量分数 2% 。
1. 3. 3 氢氧化钠溶液：质量分数 40% 。
1. 3. 4 溴甲酚绿 - 甲基红混合指示剂：将溴甲
酚绿乙醇溶液(1g/ l) 与甲基红乙醇溶液(1g/ l) 按 5 ： 1 体积比临时混合摇匀备用。
1. 3 . 5 催化剂片： 3g 硫酸钾和 0. 2g 硫酸铜混合均匀压片
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1 . 4 . 1 取样
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1 . 4 .2 消解
利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，设定消解温度参数如下表：
消化完毕后，将消化管取下冷却。
1 . 4 . 3 上机测试
待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上，开始蒸馏滴定。定氮仪设置程序如下：
式中：m-标准酸摩尔浓度（mol/l)
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