EB注意事项
分子式：c21h20brn3分子结构
英文名：ethidium bromide
分子量： 394.3139 g/mol
熔点：260 - 262 °c
为芳香族荧光化合物
eb（ethidium bromide，溴化乙锭）
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的dna。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，可用polaroid 底片或带ccd 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性! 普通实验手套（浅黄色乳胶手套）不能很好的阻挡eb，需要用蓝色实验用手套。
观察琼脂糖凝胶中dna常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入dna堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与dna的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与dna结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。dna吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-dna复合物的荧光产率比没有结合dna的染料高出20-30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时，可以检测到少至10ng的dna条带。
溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸（dna或rna）。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小，所以其荧光产率也相对较低。事实上，大多数对单链dna或rna染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。
由于在该染料存在的情况下，线状dna的电泳迁移率约降低15%，因此，当需要知道dna pian段的准确大小（如dna限制酶酶切图谱的鉴定）时，凝胶应该在无eb情况下电泳，电泳结束后用eb染色。染色完毕后，通常不需要脱色。但是在检测小量dna（小于10ng）片段时，通常要将染色后的凝胶进行脱色。
溴化乙锭的损害
溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配。溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性！
sybr green i 和溴化乙啶（eb）ames 测试结果显示eb容易引起有机体突变。(singer et al., mutat. res. 199, 439: 37- 47.)
溴化乙锭溶液的净化处理
由于溴化乙锭具有一定的毒性，实验结束后，应对含eb的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康。
(1) 对于eb含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处理：
①将eb溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml；
②加入一倍体积的0.5mol/l kmno4，混匀，再加入等量的25mol/l hcl，混匀，置室温数小时；
③加入一倍体积的2.5mol/l naoh，混匀并废弃。
(2) eb含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理：
① 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时；
② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。
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eb（ethidium bromide，溴化乙锭）
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的dna。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，可用polaroid 底片或带ccd 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性! 普通实验手套（浅黄色乳胶手套）不能很好的阻挡eb，需要用蓝色实验用手套。
观察琼脂糖凝胶中dna常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入dna堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与dna的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与dna结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。dna吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-dna复合物的荧光产率比没有结合dna的染料高出20-30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时，可以检测到少至10ng的dna条带。
溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸（dna或rna）。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小，所以其荧光产率也相对较低。事实上，大多数对单链dna或rna染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。
由于在该染料存在的情况下，线状dna的电泳迁移率约降低15%，因此，当需要知道dna pian段的准确大小（如dna限制酶酶切图谱的鉴定）时，凝胶应该在无eb情况下电泳，电泳结束后用eb染色。染色完毕后，通常不需要脱色。但是在检测小量dna（小于10ng）片段时，通常要将染色后的凝胶进行脱色。
溴化乙锭的损害
溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配。溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性！
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溴化乙锭溶液的净化处理
由于溴化乙锭具有一定的毒性，实验结束后，应对含eb的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康。
(1) 对于eb含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处理：
①将eb溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml；
②加入一倍体积的0.5mol/l kmno4，混匀，再加入等量的25mol/l hcl，混匀，置室温数小时；
③加入一倍体积的2.5mol/l naoh，混匀并废弃。
(2) eb含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理：
① 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时；
② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。
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