一、制作标本的条件是什么?
1、载玻片
厚度应在0.8~1.2mm,光吸收多,不能使激发光在标本上聚集;载玻片必须光洁,厚度均匀,无明显自发荧光。
2、盖玻片
厚度在0.17mm左右,光洁。为了加强激发光,也可用干涉盖玻片,可以使荧光顺利通过,而反射激发光,这种反射的激发光女可激发标本。
3、标本
组织切片不能太厚,太厚的话激发光大部分消耗在标本下部,而物镜直接观察到的上部不充分激发。
4、封裱剂
常用甘油,无自发荧光,无色透明,荧光的亮度在ph8.5~9.5时较亮,不易很快褪去。常用甘油混合液作封裱剂。
5、镜油
用油镜观察标本时,必须使用镜油,建议有条件的话使用特制的无荧光镜油,也可用上述甘油代替,液体石蜡也可用,只是折光率较低,对图像质量略有影响。
二、使用时需要注意哪些方面
1、按照出厂说明书要求进行操作,不要随意改变。
2、在暗室中进行检查。接上电源,点燃超高压汞灯5到15分钟,等光源发出强光稳定后,眼睛适应暗室,再开始观察标本。
3、防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。
4、检查时间每次以1到2小时左右最佳,超过90分钟的话,压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;荧光也明显减弱;最多不得超过3小时。
5、荧光显微镜光源寿命有限,标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。
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