饮料中的难消化性糊精的分析 (LB-802.5)
膳食纤维可用于预防血脂异常、便秘和肥胖。 难消化性糊精被认为是 1991 年在日本推出的特定保健用食品（tokuho）中的一种成分。分析含有大量低分子量水溶性膳食纤维（如难消化性糊精）的样品，使用酵素-高效液相色谱法。特定保健用食品标准记载了难消化性糊精的定量方法，即对一系列前处理样品进行 hplc 分析，并测定膳食纤维部分与甘油（内标物）的峰面积之比。以下是我们对市售的含有难消化性糊精的饮料进行了前处理，并参照 特定保健用食品标准中描述的步骤，使用水溶性sec用色谱柱ohpak lb-802.5分析的应用实例。 另外，前处理方法与特定保健用食品标准中描述的方法有部分不同。
*根据《食品标签标准》，低分子量水溶性膳食纤维是指色谱图中保留时间早于红色虚线位置（麦芽三糖的洗脱位置）的纤维。
前处理方法
1.将 5 ml饮料样品溶解在45 ml 0.08 m 磷酸盐缓冲液（ph 值 6.0）中。
2.加入 0.2 ml α-淀粉酶，确认 ph 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 ph 值为 6.3。
3.放入沸水浴中，在 90 ℃ 下振荡反应 30 分钟。
4.冷却后，加入 0.2 ml 蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶溶液，确认 ph 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 ph 值为 6.3。
5.在 60 ℃ 下振荡反应 30 分钟。
6.放入沸水浴中，在 100 ℃ 下加热 10 分钟。
7.冷却后，加入 3 ml用水稀释 10 倍的甘油。
8.用水定容至100 ml，制成酶处理溶液。
9.将 50 ml 酶处理液以 50 ml/h 的速度通过*离子交换树脂。 *amberlite™ ira-67 和 amberlite™ 200ct（杜邦）各25 ml 混合。
10.将约 150 ml 水通过第9步的离子交换树脂 (总流出液：200 ml）。
11.在旋转蒸发仪中浓缩。
12.加水定容至 20 ml 。
13.用 0.45 µm 膜过滤器过滤，作为hplc 样品。
sample: 20 μlpretreated beverage containing indigestible dextrin
1.dietary fiber fraction
2.glucose
3.glycerin (internal standard)
column
：shodex ohpak lb-g 6b (6.0 mm i.d. x 100 mm) + lb-802.5 (8.0 mm i.d. x 300 mm) x 2
eluent
：h2o
flow rate
：0.5 ml/min
detector
：ri
column temp.
：80 ℃
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2.加入 0.2 ml α-淀粉酶，确认 ph 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 ph 值为 6.3。
3.放入沸水浴中，在 90 ℃ 下振荡反应 30 分钟。
4.冷却后，加入 0.2 ml 蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶溶液，确认 ph 为6.0 ± 0.5。 *该样品的 ph 值为 6.3。
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