fitc-cooh(fluorescein-carboxylic acid)可以通过与氨基化合物的共价连接来实现荧光标记。以下是一种常见的方法:
1. 准备fitc-cooh溶液:将fitc-cooh溶解在适当的溶剂中,如二甲基亚砜(dmso)或二甲基甲酰胺(dmf)。根据实验需求,调整fitc-cooh的浓度。
2. 准备氨基化合物溶液:将待偶联的氨基化合物溶解在缓冲溶液中,以确保适当的ph条件和反应环境。调整氨基化合物的浓度。
3. 活化fitc-cooh:向fitc-cooh溶液中加入活化试剂,常用的活化试剂为n,n'-环己基碳二亚胺(edc)和n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)。这些活化试剂将激活fitc-cooh中的羧酸官能团,使其具有更高的反应活性。
4. 反应:将活化的fitc-cooh溶液与氨基化合物溶液混合,并在适当的反应条件下进行反应。通常情况下,反应在室温下进行一段时间,如1-2小时。反应时间可以根据具体实验设计和需要进行优化。
5. 反应停止:反应完成后,可添加一些反应停止剂,如氨基醇(如甲醇或乙醇),来中和剩余的活化试剂。
6. 纯化:为了去除未反应的fitc-cooh和其他杂质,需要对反应混合物进行纯化。常用的纯化方法包括凝胶过滤、柱层析或溶剂萃取等。选择合适的纯化方法,根据实验需求和目标分子的性质进行优化。
需要注意的是,在进行fitc-cooh与氨基化合物的共价连接反应时,应根据目标分子的性质和实验要求选择适当的反应条件和活化试剂。
cy7-dextran mw:5k
mal-peg2k-cyclo(rgdfk)
cy5.5-peg2000-sh
cy7.5-dextran mw:10k
pcl2k-peg2k-cy7
bsa-cy3(低偶联率)
bsa-cy3(高偶联率)
cy5 nhs
cy5单体
sulfo cy7 nh2
sulfo-cy5 nhs ester
sulfo cy3.5 cooh
cy3 alkyne
胱氨酸(cystine)-fitc
cyclodextrin-peg600-nh2
sulfo cy5 cooh
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