阿斯巴甜可能致癌?如何测定?

近期,“阿斯巴甜致癌”争议引起广泛关注。国际癌症研究机构、联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会近日发布报告,将阿斯巴甜归为“可能对人类致癌”(2b类致癌物)之列。
阿斯巴甜是国际食品法典委员会(cac)及中国、美国、欧盟等批准合法使用的食品添加剂。cac批准阿斯巴甜可用于冷冻饮品、口香糖、糖果、焙烤食品、水产品、调味品、碳酸饮料等,规定最大使用量为0.3g/kg——10.0g/kg。
基于标准要求,可使用悟空k2025高效液相色谱仪测定阿斯巴甜含量。
实验原理
k2025高效液相色谱仪
与阿斯巴甜同属人工合成的二肽类甜味剂的阿力甜,也是人们常用的甜味剂。阿斯巴甜的甜度可达蔗糖的200倍,阿力甜可达蔗糖甜度的2000倍。
此实验,我们用高效液相色谱法,使用悟空k2025高效液相色谱仪测定饮料中两者的含量。
试样中的阿斯巴甜、阿力甜在200 nm处有紫外吸收,经高效液相色谱测定,外标法定量。
实验方案
色谱条件
悟空k2025高效液相色谱仪:k2025 p2二元高压输液泵、k2025 as自动进样器、k2025 co柱温箱、k2025 uvd紫外-可见光检测器、wookinglab色谱工作站;
色谱柱:c18色谱柱,4.6×250 mm,5 μm或者相当的色谱柱;
流动相:乙腈 - 水(20+80);
流速:0.8 ml/min;
进样量:20 μl;
柱温:30℃;
检测器及波长:紫外-可见光检测器,检测波长为200 nm。
重复性测试
按照色谱条件进行采集,混合标准溶液(阿斯巴甜和阿力甜浓度均为5 μg/ml)的色谱图如图1所示,积分结果如表1所示。
图1混合标准溶液(浓度均为5 μg/ml)的色谱图
表1 混合标准溶液(浓度均为5 μg/ml)色谱图积分结果
目标物
阿斯巴甜
阿力甜
保留时间
(min)
7.225
11.158
峰面积
(mau.s)
387.572
222.461
峰高
(mau)
39.370
14.850
理论塔板数
12959
12977
分离度
-
12.19
对称/拖尾因子
1.18
1.08
由表1中数据可知,阿斯巴甜的理论塔板数为12959,拖尾因子为1.18;阿力甜的理论塔板数为12977,拖尾因子为1.08。
将混合标准溶液(浓度均为5 μg/ml)连续进样7针,叠加的色谱图如图2所示,结果见表2。
图2 混合标准溶液(浓度均为5μg/ml)连续进样7针叠加的色谱图
表2 混合标准溶液(浓度均为5μg/ml)连续进样7针重复性数据统计
目标物
阿斯巴甜
阿力甜
保留时间
峰面积
保留时间
峰面积
1
7.225
387.572
11.158
222.461
2
7.208
387.416
11.133
222.368
3
7.217
386.782
11.142
221.505
4
7.217
387.468
11.133
222.415
5
7.225
387.013
11.150
222.610
6
7.225
386.430
11.150
222.238
7
7.217
386.083
11.150
222.631
平均值
7.219
386.966
11.145
222.318
rsd%
0.088
0.146
0.085
0.173
由表2中数据可知,混合标准溶液(浓度均为5 μg/ml)连续进样7针重复性测试,阿斯巴甜保留时间的rsd为0.088%,峰面积的rsd为0.146%,阿力甜保留时间的rsd为0.085%,峰面积的rsd为0.173%,均具有良好的定性定量重复性。
含量测定
校准曲线
按照色谱条件进行采集,将混合标准系列溶液上机测定,混合标准系列溶液叠加的色谱图如图3所示。
图3 混合标准系列溶液叠加色谱图
阿斯巴甜、阿力甜在测定浓度范围内均呈现良好的线性关系,确定系数r2均在0.9999以上。
含量测定
按照步骤对饮料样品进行处理,并进行加标回收实验。空白溶液的色谱图、样品的色谱图及样品加标的色谱图如图4~图6所示。
图4空白的色谱图
图5 样品的色谱图
图6 样品加标的色谱图
经计算,样品中未检出阿斯巴甜及阿力甜,加标回收率分别为102.6%和98.6%。
结论
通过对阿斯巴甜、阿力甜的理论塔板数、重复性、灵敏度、线性的测试以及对样品中阿斯巴甜和阿力甜的含量进行测定,实验结果表明:
阿斯巴甜的理论塔板数为12959,拖尾因子为1.18;阿力甜的理论塔板数为12977,拖尾因子为1.08,均有良好的峰型;混合标准溶液连续进样7针重复性测试,阿斯巴甜保留时间的rsd为0.088%,峰面积的rsd为0.146%,阿力甜保留时间的rsd为0.085%,峰面积的rsd为0.173%,均具有良好的定性定量重复性;
灵敏度测试中,阿斯巴甜的仪器检出限为7.229 ng/ml,仪器定量限为24.095 ng/ml;阿力甜的仪器检出限为19.771 ng/ml,仪器定量限为65.902 ng/ml;阿斯巴甜、阿力甜在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,确定系数r2均大于0.9999;对样品进行测试,样品中未检出阿斯巴甜及阿力甜,加标回收率分别为102.6%和98.6%。
因此,wooking k2025可以满足《gb 5009.263-2016 食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》中阿斯巴甜和阿力甜含量测定的需求。
关于甜味剂是否会损害健康的争议从未停止。但“合理适量”是永远的重点。
国家食品安全风险评估中心回应:阿斯巴甜按照我国现行标准规范使用可以保障安全,将继续关注并通过严谨的标准和严格的监管,确保食品安全的底线。
抛开剂量谈危害是不科学的,虽然阿斯巴甜并没有那么可怕,但我们仍要注意绝不能无限摄入。

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