TRIZOL提取RNA详细步骤，助力科研！
trizol法提取总rna的原理
trizol试剂的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是对细胞进行裂解，从而使细胞当中的蛋白质以及核酸物质解聚而得以释放。苯/酚虽然可以有效的使蛋白质变性，但它不能wan全抑制rna酶的活性，因此trizol中还加入了8－羟基喹/啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源rnase（即rna酶）。
trizol试剂不但可用于小量样品（组织：50-100mg；细胞：5×106），也可用于大量样品（组织≥1g或细胞≥107），对动物、植物、细菌、血液提取都适用，可同时处理大量不同样品。反应迅速，提取的总rna没有dna和蛋白质污染，可用于northernblot、rt-pcr、rnase保护分析等。
trizol提取rna的详细步骤
1、在提取组织rna时，每50～100mg组织用1ml trizol试剂对组织进行裂解；提取细胞rna时，先离心沉淀细胞，每5-10
╳106个细胞加1ml trizol后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞。
2、将组织或细胞的trizol裂解液转入ep管中,在室温15~30c下放置5分钟；在ep管中，按照每1ml
trizol加0.2ml氯仿的量加入氯仿，盖上ep管盖子，在手中用力震荡15秒，在室温下（15℃～30℃）放置2～3分钟后，12000g（2℃～8℃）离心15分钟。
3、取上层水相置于新ep管中,按照每1ml
trizol加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇，在室温下（15℃～30℃）放置10分钟,12000g（2℃～8℃）离心10分钟。
4、按照每1ml
trizol加1ml 75%乙醇进行洗涤，涡旋混合，7500g（2℃～8℃）离心5分钟，弃上清；让沉淀的rna在室温下自然干燥；用rnase-freewater溶解rna沉淀。
ps:在收集到生物材料之后，最好马上进行rna制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备rna时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免rnase的作用。
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3、取上层水相置于新ep管中,按照每1ml
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