高保真PCR反应预混液说明
产品简介
hifi amplification mix是一种新型高保真pcr扩增预混液，适用于高通量测序文库的pcr扩增和其他pcr相关的克隆和检测。
扩增预混液中的ultra hifi dna polymerase是通过定向分子进化技术开发得到的新型快速高保真dna聚合酶，增强了dna聚合酶对模板的亲和力，使得此酶在扩增速度和延伸能力上得到了提升，增加了pcr成功率和产物量。同时，此酶具有优良的3'- 5'外切酶活性（proofreading活性），保真性可达市场上主流产品水平，保证了基因和文库扩增过程中的真实性。此外，本产品中的dna聚合酶具有热启动（hot start）功能，可有效的控制低温情况下的非特异扩增和酶活损耗，进而保证了pcr扩增的特异性和稳定性。
本产品为一管式预混mix形式，内含热启动型的ultra hifi dna polymerase、超纯dntps、mgcl2、反应缓冲液等pcr反应所需组分，只需加入模板和引物即可进行pcr扩增反应，操作简便。除此之外，预混mix中还整合了pcr反应增强系统，不但提高了预混mix的稳定性，使得聚合酶对pcr反应抑制剂的耐受能力增强，还提高了ultra hifi dna polymerase对不同gc含量模板的适应能力，使得本产品具有广泛的样品普适性和模板投入范围，有效降低pcr反应的偏好性。
本产品的pcr产物为平末端，可加a处理再与t载体连接或直接使用平末端克隆载体进行基因克隆，如tiangen零背景快速连接试剂盒（目录号：vt205）。
保存条件
请将试剂盒置于-25~-15℃保存，避免反复冻融。保质期为一年。
产品特点
扩增快速：延伸速度可达10-15 sec/kb； 延伸力强：可扩增长至15 kb的dna片段；
特异性好：具有热启动功能，可用于多重pcr；
灵敏度高：模板用量可低至10 pg；
偏好性低：针对不同gc含量的模板都有均衡的扩增效果；
应用广泛：可用于高通量测序文库的pcr扩增和其他pcr相关的克隆和检测。
适用范围
用于dna的高保真快速扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、基因组点突变的分析 （snp）等；更可用于高通量测序中，如高保真基因组dna文库的富集。
实验例
实验1
使用分子信标法（ma et al.,anal biochem, 2006）检测不同高保真酶的热启动性。所有产品均宣传其具有热启动能力，但检测结果表明这些产品中只有ultrahifi在95度时才被激活，其余产品在40-50度时均有链退火和延伸能力。
实验2
使用lac i法检测酶的保真性。tiangenultrahifi的保真性是普通taq酶的50倍以上
实验3
实验4
实验5
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