RIG-I 信号通路

rig-i 配体
• 5’ppp-dsrna
5’ppp-dsrna 是一种5’三磷酸双链rna,通过一个由19个核酸分子通过磷酸二酯键聚合成的5`三磷酸单链rna和其非三磷酸互补链杂交形成。5’ppp-dsrna的序列可以通过筛选各种序列突变体确定。未加帽的5’三磷酸双链rna能够被rig-i特异性识别。
• 3p-hprna
3p-hprna是通过体外转录甲型流感病毒(h1n1)序列而产生的5’三磷酸发夹rna。这个有87个核酸分子的rna寡核苷酸含有未加帽的5`三磷酸酯末端和双链片段,它们是rig-i识别的特征结构。3p-hprna是rig-i的一种有效并特异性的激动剂。
rig-i/mavs 报告基因细胞
invivogen欣博盛生物提供一系基于人源肺癌细胞株a549,小鼠巨噬细胞raw和人源胚肾细胞hek293稳转细胞系,助力rna感受器rig-i信号通路的研究。这些细胞系包括rig-i或mavs基因的敲除细胞株(衍生自a549或raw细胞系)或者rig-i基因的过表达细胞株(衍生自hek-293细胞系)。
• a549-dual™
• a549-dual™ ko-rig-i
• a549-dual™ ko-mavs
• raw-lucia™ isg
• raw-lucia™ isg ko-rig-i
• raw-lucia™ isg ko-mavs
• hek-lucia™ null
• hek-lucia™ rig-i
描述
所有的rig-i/mavs报告基因细胞系均表达一个含有分泌型荧光素酶基因isg(干扰素刺激基因)诱导型构件。活化rig-i/mavs信号通路可诱导isg启动子的活化并产生荧光素酶,该酶存在于细胞上清并能够通过荧光素酶检测试剂quanti-luc™检测定量。源于a549的细胞携带一个额外的nf-κb诱导表达分泌型碱性磷酸酶(seap)基因构件,该酶的活性能够通过seap检测试剂quanti-blue™检测定量。
这些rig-i/mavs报告基因细胞株携带zeocin™单抗性基因或zeocin™和blasticidin(参见最后一页)双抗性基因。
结果
使 用 rig-i激动剂,复合了 lyovec™的 5’ppp-dsrna和3p-hprna刺激a549-dual™和raw-lucia™ isg细胞系,isg应答显著。在a549-dual™细胞中3p-hprna激动性强度明显高于5’pppdsrna,30 ng/ml的3p-hprna复合物活化信号已明显高于300 ng/ml 5’ppp-dsrna的复合物。相反,在rig-i-ko或mavs-ko细胞株中应答消失。使用rig-i配体刺激hek-lucia™对照细胞时isg反应很弱。而在hek-lucia™ rig-i细胞中,由于rig-i基因的组成型过表达导致这种应答尤为强烈。同样,当使用3p-hprna和5’ppp-dsrna时观察到更高水平的isg应答。在衍生自a549的细胞株中nf-κb对于rig-i配体的反应跟isg应答是相似的,虽然前者更弱一些(参考网站数据)。
isg对rig-i配体的反应:使用300 ng/ml的5’ppp-dsrna或30 ng/ml的3p-hprna刺激衍生自a549的细胞;使用1 μg/ml 5’ppp-dsrna或3p-hprna刺激衍生自raw和hek293的细胞。经过孵育过夜,可使用quanti-luc™检测上清中lucia荧光素酶活性的相对光单位(rlus)以测试isg的反应。
product quantity cat.code
a549-dual™ cells 3-7 x 10^6 cells a549d-nfis
a549-dual™ ko-mavs cells 3-7 x 10^6cells a549d-komavs
a549-dual™ ko-rig-i cells 3-7 x 10^6cells a549d-korigi
raw-lucia™isg cells 3-7 x 10^6cells rawl-isg
raw-lucia™isg-ko-mavs cells 3-7 x 10^6cells rawl-komavs
raw-lucia™isg-ko-rig-i cells 3-7 x 10^6cells rawl-korigi
hek-lucia™ null cells 3-7 x 10^6cells hkl-null
hek-lucia™ rig-i cells 3-7 x 10^6cells hkl-hrigi
5’ppp-dsrna 25 µg tlrl-3prna
3p-hprna 25 µg tlrl-hprna
相关产品
product description cat. code
quanti-luc™ luciferase detection reagent rep-qlc1
quanti-blue™ seap detection reagent rep-qb1
详情请联系 invivogen 全国授权代理-欣博盛生物科技

施克光电开关WTB11-2P2461京南华建现货销售
中国制造的“突围将成为重点扶持领域00
意大利FIP阀门 气动塑料球阀 进口气动球阀 意大利FIP阀
小型医疗机构污水处理设备
浅析加工中心钢板防护罩磨损原因及解决方法
RIG-I 信号通路
植物植株营养测定仪测量原理
橡胶拉力试验机的特点介绍
DANFOSS柱塞泵OMV400 151B2161优势
WRIGHT FLOW
核相仪使用注意事项
声入人心 科学仪器揭秘声音的奥秘
臭氧发生器对食品及饮料杀菌的验证技术
阀门压力等级换算对照表
KWIKSTRUT成品支吊架优势
1.4539 QT700不锈钢化学成分是什么
果蔬破碎设备厂家果蔬加工对原料的要求
导致中开泵效率低下的原因有哪些呢
油分离器对于超低温制冷机的影响
MF420-O氧化锆氧量分析仪锅炉业*款