T7 RNA聚合酶 (1 KU/μL)说明书
t7 rna聚合酶 (1 ku/μl)说明书
产品详情
t7 rna polymerase，即t7 rna聚合酶，是t7噬菌体dna编码的酶，对t7启动子序列具有高度特异性 。本酶是依赖于dna的rna聚合酶，具有 5′→3′的rna聚合酶活性，可以催化单链或双链dna t7启动子下游ntp的掺入，合成与t7启动子下游的模板dna互补的rna。
特点
该酶对t7启动子具有高度特异性，不识别其它生物来源的启动子。可以识别修饰的核苷酸，例如生物素标记、荧光素标记、放射性同位素、地高xin标记dntp，用于各种标记rna的合成，进行下游实验。
来源：携带t7 rna聚合酶基因的e. coli
分子量：99 kda
纯度：≥90%
比活：1 ku/μl
比活单位定义：在37℃、1小时内使1 nmol的cmp掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位
存储缓冲液：50 mm tris-hcl，100 mm nacl，20 mm β-me，1 mm edta，50% 甘油，0.1% (w/v) triton x-100， ph 7.9
产品包装规格及组成
产品编号 产品名称 规格 产品组成
10×transcription buffer mg 2+ (400 mm) t7 rna polymerase (1 ku/μl)
78mrna-1104a t7 rna聚合酶 (1 ku/ul) 50 ku 150 ul 100 ul 50 ul
78mrna-1104b t7 rna聚合酶 (1 ku/ul) 200 ku 500 ul 500 ul 200 ul
78mrna-1104c t7 rna聚合酶 (1 ku/ul) 1000 ku 1.25 ml×2 2 ml 1 ml
质量控制
1. sds-page胶检测仅可见清晰单一的目的条带，毛细管电泳检测纯度在95%以上；
2. 酶动力学实时荧光法显示无dna酶及rna酶污染。
应用举例
【rna 体外转录合成 】
1. 在rnase free的离心管中加入右侧表格中各组分配制反应体系；
2. 将上述反应液混合均匀，低速离心至管底，37 ℃孵育4个小时。若转录本长度小于100 nt，增加反应时间至4-8个小时；
3. 转录后取样品进行凝胶电泳，取样1 μl稀释到5 μl，然后用1%的琼脂糖凝胶进行检测，以确定转录是否成功；
4. 反应完成后，加入dnase ⅰ（rnase free），37 ℃孵育30 min以去除模板dna
组分 体积
dnase/rnase-free water up to 20 ul
atp/ctp/gtp/utp (100 mm each) 2 ul each
10×transcription buffer 2 ul
dna template 0.5 ~ 2 ug
rnase inhibitor (40 u/u l) 0.5 ul
inorganic pyrophosphatase (0.1 u/ul) 0.5 ul
t7 rna polymerase (1 ku/ul) 0.2 ~ 1 ul
mg 2+ (400 mm) 1 ul
total volume 20 ul
运输与保存
运输条件：蓝冰/干冰运输
保存温度：-20 ℃以下保存
避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中，shou次使用时建议进行分装。
产品效期：12个月
注意事项
1. 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20 ℃保存；
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
3. 产品仅供研究使用。
货号 品名 规格 品牌
78mrna-1104a t7 rna聚合酶 (1 ku/μl) 50 ku biohub
78mrna-1104b t7 rna聚合酶 (1 ku/μl) 200 ku biohub
78mrna-1104c t7 rna聚合酶 (1 ku/μl) 1000 ku biohub
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产品详情
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特点
该酶对t7启动子具有高度特异性，不识别其它生物来源的启动子。可以识别修饰的核苷酸，例如生物素标记、荧光素标记、放射性同位素、地高xin标记dntp，用于各种标记rna的合成，进行下游实验。
来源：携带t7 rna聚合酶基因的e. coli
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纯度：≥90%
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比活单位定义：在37℃、1小时内使1 nmol的cmp掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位
存储缓冲液：50 mm tris-hcl，100 mm nacl，20 mm β-me，1 mm edta，50% 甘油，0.1% (w/v) triton x-100， ph 7.9
产品包装规格及组成
产品编号 产品名称 规格 产品组成
10×transcription buffer mg 2+ (400 mm) t7 rna polymerase (1 ku/μl)
78mrna-1104a t7 rna聚合酶 (1 ku/ul) 50 ku 150 ul 100 ul 50 ul
78mrna-1104b t7 rna聚合酶 (1 ku/ul) 200 ku 500 ul 500 ul 200 ul
78mrna-1104c t7 rna聚合酶 (1 ku/ul) 1000 ku 1.25 ml×2 2 ml 1 ml
质量控制
1. sds-page胶检测仅可见清晰单一的目的条带，毛细管电泳检测纯度在95%以上；
2. 酶动力学实时荧光法显示无dna酶及rna酶污染。
应用举例
【rna 体外转录合成 】
1. 在rnase free的离心管中加入右侧表格中各组分配制反应体系；
2. 将上述反应液混合均匀，低速离心至管底，37 ℃孵育4个小时。若转录本长度小于100 nt，增加反应时间至4-8个小时；
3. 转录后取样品进行凝胶电泳，取样1 μl稀释到5 μl，然后用1%的琼脂糖凝胶进行检测，以确定转录是否成功；
4. 反应完成后，加入dnase ⅰ（rnase free），37 ℃孵育30 min以去除模板dna
组分 体积
dnase/rnase-free water up to 20 ul
atp/ctp/gtp/utp (100 mm each) 2 ul each
10×transcription buffer 2 ul
dna template 0.5 ~ 2 ug
rnase inhibitor (40 u/u l) 0.5 ul
inorganic pyrophosphatase (0.1 u/ul) 0.5 ul
t7 rna polymerase (1 ku/ul) 0.2 ~ 1 ul
mg 2+ (400 mm) 1 ul
total volume 20 ul
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运输条件：蓝冰/干冰运输
保存温度：-20 ℃以下保存
避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中，shou次使用时建议进行分装。
产品效期：12个月
注意事项
1. 使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20 ℃保存；
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
3. 产品仅供研究使用。
货号 品名 规格 品牌
78mrna-1104a t7 rna聚合酶 (1 ku/μl) 50 ku biohub
78mrna-1104b t7 rna聚合酶 (1 ku/μl) 200 ku biohub
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