分享invitrogen胶原蛋白酶抗体操作步骤
invitrogen胶原蛋白酶常见的有两种,一为novo蛋白酶,另一为carsberg蛋白酶,两者的性质和构造相近,分别含275和274个氨基酸残基,由一条多肽链构成。在ph6～10下稳定,低于6或大于11时很快失活。它不但能水解肽键,还具有水解酰胺键、酯键以及转酯和转肽的功能。由于酶的专一性，它只能对蛋白质水解，不能作用于淀粉、脂肪等物质。
invitrogen胶原蛋白酶的主要来源为微生物提取，研究和应用较多的主要是芽孢杆菌，以枯草杆菌为最，也有少量其他菌种，比如链霉菌。天然菌种的生物试剂能力和所含的酶活性、稳定性往往达不到工业生物试剂的需求，需要对菌种进行筛选改进，常用的方法有诱变、基因工程、蛋白质工程、孢子热处理等。主要目标是提高酶的活性、稳定性(耐温耐碱)、抗氧化、抗螯合性能。
日常生活中常见的例子是洗衣粉中的蓝粒子，包装上一般会附有其使用方法，需要注意，invitrogen胶原蛋白酶只有在合适的ph区间内才有活性，在酸性条件下没有活性。
invitrogen胶原蛋白酶抗体操作步骤如下：
1)将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2)加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4)加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如hbsag、hbeag、afp、hcg等。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体分别取自不同种属的动物。如应用单抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。
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