土壤蔗糖酶检测试剂盒资料-齐一生物
土壤蔗糖酶(solid-sucrase, s-sc）试剂盒说明书
for research use only
仅供研究用
货号：qys-235096
分光光度法 50 管/24 样
土壤蔗糖酶(solid-sucrase, s-sc）试剂盒说明书测定意义：
s-sc 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理：
s-sc 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 s-sc 活性成正比。
自备用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：甲苯 5ml×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体 15ml×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 40ml 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体 30ml×1 瓶，4℃保存。
土壤蔗糖酶(solid-sucrase, s-sc）试剂盒说明书测定步骤和加样表：
试剂名称 测定管 对照管
风干土样（g） 0.1 0.1
试剂一（μl） 15 15
振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15min
试剂二（μl） 250 250
试剂三（μl） 750
蒸馏水（μl） 750
充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液
上清液（μl） 200 200
试剂四（μl） 500 500
充分混匀，放入沸水浴中煮沸 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀，蒸馏水稀释 10 倍后（可以吸取 100μl，加入 900μl 蒸馏水稀释；如果吸光度大于 4，可以适当加大稀释倍数），510nm 处蒸馏水调零，读吸光值 a。计算 δa=a 测定管-a 对照管。每个测定管需设一个对照管。
s-sc 活性计算：
标准条件下测定的回归方程为 y = 4.9x -0.062；x 为标准品浓度（mg/ml），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 s-sc 活力单位。
s-sc 活力(u /g 土样)=( δa+0.062) ÷4.9×10×v 反总÷w÷t =20.7×(δa+0.062) 10：稀释倍数；t：反应时间，1d； v 反总：反应体系总体积：1.015ml；w：样本质量，
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测定原理：
s-sc 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 s-sc 活性成正比。
自备用品：
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试剂组成和配制：
试剂一：甲苯 5ml×1 瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体 15ml×1 瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 40ml 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
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试剂名称 测定管 对照管
风干土样（g） 0.1 0.1
试剂一（μl） 15 15
振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15min
试剂二（μl） 250 250
试剂三（μl） 750
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充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液
上清液（μl） 200 200
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s-sc 活性计算：
标准条件下测定的回归方程为 y = 4.9x -0.062；x 为标准品浓度（mg/ml），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 s-sc 活力单位。
s-sc 活力(u /g 土样)=( δa+0.062) ÷4.9×10×v 反总÷w÷t =20.7×(δa+0.062) 10：稀释倍数；t：反应时间，1d； v 反总：反应体系总体积：1.015ml；w：样本质量，
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