Caco-2细胞培养攻略
caco-2细胞分离自一名72岁男性的直肠原位癌细胞，当长到满时表现出特征性的肠上皮细胞分化。因此，caco-2细胞模型是十几年来国外广泛采用的一种研究药物小肠吸收的体外模型，具有相对简单、重复性较好、应用范围较广的特点。
表1 caco-2细胞基本信息
名称
caco-2（人结直肠腺癌细胞）
形态
上皮样
生长特性
贴壁
营养体系
79%mem基础培养基（abs9503）+20%胎牛血清优级（abs972）+1%双抗（abs9244）
图1 caco-2（人结直肠腺癌细胞）
首先，我们要讨论的第一个问题是如何判断细胞状态好不好？为了更直观地了解细胞状态，我们可以看一下如下图2和图3。正常的caco-2细胞呈岛状生长，细胞间连接紧密，细胞群的边界光滑，细胞群中常常含有巨大的空泡（属于正常现象）。
图2 caco-2正常形态
图3 caco-2正常形态
接下来，我们讨论第二个问题是该细胞消化难问题。该类细胞间连接紧密，细胞难以消化解离，并且培养时间越久，细胞间连接越紧密越难消化。所以，消化时要注意以下几点：
1、消化前用pbs（abs9459）清洗细胞两遍；
2、消化时间控制在5-10分钟，当细胞能够被吹散为小的细胞团块时，即可终止消化；
3、消化吹打成单个细胞再进行传代。
最后，我们要讨论的是细胞贴壁和增殖缓慢问题。尤其刚复苏时细胞贴壁特别慢，一般2到3天贴壁展开（还可能会有空泡）；有少量发亮的细胞漂浮或黏附在细胞克隆上是正常的，随后会进入克隆并正常生长；为避免在细胞附着初期干扰细胞，建议到第三天再换液。
同时该细胞增殖缓慢，倍增时间约为72小时，按1:3传代的情况下，约一周传代一次。由于该细胞对营养需求高，建议使用20%的优级胎牛血清（abs972）。如果细胞随着培养过程，漂浮得越来越严重，甚至大块儿飘起，就要检查培养基成分和培养环境是否出现异常。
本期讲解就到这里了，如有细胞培养问题，欢迎扫码加入我们微信群交流。
注：图源网络和客户，仅供参考学习用
表2 小爱推荐细胞培养类产品
货号
品名
规格
abs981
胎牛血清（特级）
500ml
abs972
胎牛血清（优级）
500ml
abs974
胎牛血清（标准级）
500ml
abs9483
高糖dmem培养基
500ml
abs9484
rpmi-1640培养基
500ml
abs9505
mem培养基
500ml
abs9506
α-mem培养基
500ml
abs9554
ham's f-12培养基
500ml
abs9563
ham's f-12k培养基
500ml
abs9561
dmem/f-12培养基
500ml
abs962
pbs缓冲液
500ml
abs970
d-pbs缓冲液（不含 ca2+mg2+）
500ml
abs971
d-pbs缓冲液（含 ca2+mg2+）
500ml
abs9257
hanks平衡盐溶液（不含 ca2+mg2+）
500ml
abs9258
hanks平衡盐溶液（含 ca2+mg2+）
500ml
abs47014938
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%），含酚红
100ml
abs47047375
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%），不含酚红
100ml
abs9479
无dmso无血清细胞冻存液
100ml
abs9417
无血清细胞冻存液
100ml
abs9473
细胞冻存液（含血清）
100ml
abs9474
组织保存液
100ml
abs9480
组织冻存试剂盒
30ml
abs9486
模具
1个/套
abs9487
小刀
5片/包
abs9481
组织复苏试剂盒
50ml
abs42020125
卡那霉素b硫酸盐
250mg
abs42018967
硫酸庆大霉素溶液
10ml
abs9244
青链双抗
100ml
abs9245
青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液
100ml
abs42013298
两性霉素b
1g
abs44071148
制霉菌素
1g
abs9246
青霉素-链霉素-两性霉素b混合溶液
100ml
abs9252
支原体检测试剂盒
100t
abs9375
支原体清除试剂
200ul×5
abs9376
支原体预防
500ul×4
abs816578
环丙沙星盐酸盐
500mg
abs9374
水盘抑菌剂
20ml
abs9371
水浴锅抑菌剂
100ml
abs9372
培养箱除菌剂
480ml
abs9373
细胞房除菌剂
480ml
absin特色产品线：
wb相关：ecl发光液、预染marker、预制胶；ihc相关：二抗试剂盒、组化笔；ip/coip试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、bsa、蛋白酶k、ctb、ttx、cee；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；elisa试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
QBY气动隔膜泵在使用操作运行的过程中要注意以下几点
日本SMC增压阀内部有可以活动的零部件
中心传动垂架式刮泥机型号参数简介
在线状态检测与故障诊断的意义及发展现状
沥青和高分子卷材防水卷材不透水仪技术规范试验说明
Caco-2细胞培养攻略
德国KRACHT齿轮泵流量不足怎么办
土壤紧实度测量仪助力植物生长
生物化学生化培养箱保护措施
德国Conti Elektron
电表箱箱体材料的组成
高浓度有机废水预处理--铁炭微电解概述
反应釜的使用范围
你了解玻璃分液萃取器吗，它的原理是怎么样的？
湿式静电除尘器具备足够强度保持自己的形状
德国EPK品牌MiniTest 600涂层测厚仪使用注意事项
环氧煤沥青漆和煤焦油沥青漆性能
介绍热喷涂的三种不常规应用
供水流量表厂家,二次供水流量计价格,供水管道计
电缆串联谐振及电缆交流耐压试验方法有几种
表1 caco-2细胞基本信息
名称
caco-2（人结直肠腺癌细胞）
形态
上皮样
生长特性
贴壁
营养体系
79%mem基础培养基（abs9503）+20%胎牛血清优级（abs972）+1%双抗（abs9244）
图1 caco-2（人结直肠腺癌细胞）
首先，我们要讨论的第一个问题是如何判断细胞状态好不好？为了更直观地了解细胞状态，我们可以看一下如下图2和图3。正常的caco-2细胞呈岛状生长，细胞间连接紧密，细胞群的边界光滑，细胞群中常常含有巨大的空泡（属于正常现象）。
图2 caco-2正常形态
图3 caco-2正常形态
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1、消化前用pbs（abs9459）清洗细胞两遍；
2、消化时间控制在5-10分钟，当细胞能够被吹散为小的细胞团块时，即可终止消化；
3、消化吹打成单个细胞再进行传代。
最后，我们要讨论的是细胞贴壁和增殖缓慢问题。尤其刚复苏时细胞贴壁特别慢，一般2到3天贴壁展开（还可能会有空泡）；有少量发亮的细胞漂浮或黏附在细胞克隆上是正常的，随后会进入克隆并正常生长；为避免在细胞附着初期干扰细胞，建议到第三天再换液。
同时该细胞增殖缓慢，倍增时间约为72小时，按1:3传代的情况下，约一周传代一次。由于该细胞对营养需求高，建议使用20%的优级胎牛血清（abs972）。如果细胞随着培养过程，漂浮得越来越严重，甚至大块儿飘起，就要检查培养基成分和培养环境是否出现异常。
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货号
品名
规格
abs981
胎牛血清（特级）
500ml
abs972
胎牛血清（优级）
500ml
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胎牛血清（标准级）
500ml
abs9483
高糖dmem培养基
500ml
abs9484
rpmi-1640培养基
500ml
abs9505
mem培养基
500ml
abs9506
α-mem培养基
500ml
abs9554
ham's f-12培养基
500ml
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ham's f-12k培养基
500ml
abs9561
dmem/f-12培养基
500ml
abs962
pbs缓冲液
500ml
abs970
d-pbs缓冲液（不含 ca2+mg2+）
500ml
abs971
d-pbs缓冲液（含 ca2+mg2+）
500ml
abs9257
hanks平衡盐溶液（不含 ca2+mg2+）
500ml
abs9258
hanks平衡盐溶液（含 ca2+mg2+）
500ml
abs47014938
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%），含酚红
100ml
abs47047375
胰蛋白酶-edta消化液（0.25%），不含酚红
100ml
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无dmso无血清细胞冻存液
100ml
abs9417
无血清细胞冻存液
100ml
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细胞冻存液（含血清）
100ml
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组织保存液
100ml
abs9480
组织冻存试剂盒
30ml
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模具
1个/套
abs9487
小刀
5片/包
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组织复苏试剂盒
50ml
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卡那霉素b硫酸盐
250mg
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硫酸庆大霉素溶液
10ml
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青链双抗
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青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液
100ml
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1g
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1g
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青霉素-链霉素-两性霉素b混合溶液
100ml
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支原体检测试剂盒
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支原体清除试剂
200ul×5
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500ul×4
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500mg
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水盘抑菌剂
20ml
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水浴锅抑菌剂
100ml
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培养箱除菌剂
480ml
abs9373
细胞房除菌剂
480ml
absin特色产品线：
wb相关：ecl发光液、预染marker、预制胶；ihc相关：二抗试剂盒、组化笔；ip/coip试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、bsa、蛋白酶k、ctb、ttx、cee；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；elisa试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...
QBY气动隔膜泵在使用操作运行的过程中要注意以下几点
日本SMC增压阀内部有可以活动的零部件
中心传动垂架式刮泥机型号参数简介
在线状态检测与故障诊断的意义及发展现状
沥青和高分子卷材防水卷材不透水仪技术规范试验说明
Caco-2细胞培养攻略
德国KRACHT齿轮泵流量不足怎么办
土壤紧实度测量仪助力植物生长
生物化学生化培养箱保护措施
德国Conti Elektron
电表箱箱体材料的组成
高浓度有机废水预处理--铁炭微电解概述
反应釜的使用范围
你了解玻璃分液萃取器吗，它的原理是怎么样的？
湿式静电除尘器具备足够强度保持自己的形状
德国EPK品牌MiniTest 600涂层测厚仪使用注意事项
环氧煤沥青漆和煤焦油沥青漆性能
介绍热喷涂的三种不常规应用
供水流量表厂家,二次供水流量计价格,供水管道计
电缆串联谐振及电缆交流耐压试验方法有几种