电镜铜网和支持膜问与答
海德公司内部交流资料
在日常的技术支持工作中,经常碰到不同的客户的同一个问题,回答的多了,就慢慢总结出来大多数实验者急需知道的知识。这里列举一二,供大家参考。
1.铜网、碳支持膜、微栅、超薄碳膜、多孔膜有什么区别?
铜网:平常做透射电镜所用的铜网,即为承载样品的载网。载网若是铜材质,就称铜网,如果是镍、钼、金、尼龙,就相应的称镍网、钼网、金网、尼龙网。铜网也称“裸网”。主要应用在生物制样中,可配合切片机,在水槽中用“裸网”捞取样品。再进行喷碳处理,然后进入电镜观察。
碳支持膜:大多数透射电镜样品在制样时,为了确保样品能搭载在“载网”上,会在“载网”上覆一层有机膜,称为“支持膜”。这种具有支持膜的载网,称为“载网支持膜”。当样品接触载网支持膜时,会很牢固的吸附在支持膜上,不至于从载网的孔洞处滑落。以便在电镜下观察。
当样品放在电镜中,“载网支持膜”会被电子束照射,有机支持膜上就会产生电荷积累,也会引起样品放电,发生样品飘逸、跳动、支持膜破裂等情况。所以,人们考虑在支持膜上喷碳,提高支持膜的导电性,达到良好的观察效果。这种经过“喷碳的载网支持膜”,简称“碳支持膜”,一般膜厚度为10-20nm。
从制作成本和使用效果看,铜网实用,所以被普遍采用。因此,人们经常提到的“铜网支持膜”、“碳支持膜”、“碳膜”、“方华膜”等,甚至被误称的“铜网”,在我们的产品里面,就成为“碳支持膜”。注意,碳支持膜实际上是两层膜,一层有机膜(方华膜),上层碳膜。
微栅支持膜 微栅是支持膜的一个品种,它是在制作支持膜时,特意在膜上制作了微孔,俗称“微栅”,它主要是为了能够使样品搭载在支持膜微孔的边缘,以便使样品“无膜”观察。无膜的目的主要是为了提高图像衬度。
所以,观察管状、棒状、纳米团聚物等,常用“微栅”支持膜,效果很好。特别是观察这些样品的高分辨像时,更是的选择。
一般直径小于20nm的粉体才直接捞,颗粒再大则是包埋后离子减薄。捞样品常用的有碳支持膜和小孔微栅,小孔微栅上其实也有一层超薄的碳膜。
超薄碳膜 也是支持膜的一种。它是在微栅的基础上,叠加了一层很薄的碳膜,一般3-5nm。这层超薄碳膜的目的,是用薄碳膜把微孔挡住。既然微栅观察效果,为什么还要把孔挡住呢?这主要是针对那些分散性很好的纳米材料,如:10nm以下的样品,分散性*的样品。
多孔碳支持膜 据有普通碳支持膜和微栅支持膜共同特点的产品。普通碳支持膜以观察形貌和考擦分散性为主,微栅支持膜以看高分辨为主。由于多孔膜有较大的支持膜面积,膜上又偶有微孔,这样就可以兼得纳米微粒的分散性考察和形貌像、高分辨像获取。是一款很实用的支持膜产品。我公司代理的德国quantifoil公司生产的quantifoil多孔碳支持膜,与普通多孔碳膜相比,其固定的几何外形便于在tem上进行自动化操作。孔表面积大,可降低支持膜干扰造成的样品失真。这在电子衍射,电子能量损失谱成像和暗场成像中非常重要。可用于支撑超薄碳膜或直接作为较大样品的载体。此种膜还可应用于物质纳米特征研究,如生物大分子复合体在载体自由悬层的研究。膜孔径的定制范围为1-7μm。膜厚度:18-20nm。
2.观察长度不等的纳米管的高分辨,选用哪种膜?
看纳米管一般有两个目的,一是看长度,主要用低倍观察;二是看管壁,主要是看高倍像。无论长度多少,只要看高倍像,特别是高分辨,用微栅膜或多孔膜。它既可以满足低倍观察长度,也可以满足高分辨观察的要求。但是你一定要选择“高分辨透射电镜”(hrtem),否则,你的微栅膜就很难发挥作用。通常情况下,好的“碳支持膜”也能看到碳纳米管壁的高分辨像,但它一定不会超过用“微栅膜”观察的效果。理由是:微栅膜上有孔,管壁可以在微栅的孔洞处观察,而碳支持膜没有孔,膜层背底会影响高分辨的观察。粉末样品也是同样的道理。
3.观察纳米材料和生物材料用什么铜网支持膜合适?
次选购碳支持膜,往往不知道选用哪种目数的铜网支持膜合适。通常情况下,做纳米材料,选用300目或200目铜网碳支持膜较适宜;做生物材料(切片样品),选用200目或150目铜网碳支持膜较适宜。
如果做纳米材料(50nm以下),而且要看高分辨像,选择微栅;如果做纳米材料(10nm以下),样品分散性很好,选用超薄碳支持膜。但前提是要用高分辨电镜(200kv以上)。如果使用的是100kv的电镜,不必要选用微栅膜。
4.免疫电镜实验一般要选择哪种网?
免疫电镜用载网要选用镍网或金网,而不用铜网,因铜网会与某些化学物质产生反应而影响标记结果。
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