原子吸收光度计是应用液体的表面张力特性,样品体积只需要1ul,在侦测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量,高浓度,免石英管,免毛细管等耗材侦测吸收值的优点。
原子吸收光度计可提供200~850nm的全光谱侦测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度ccd array侦测器,侦测吸收值可高达300abs(dsdna浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可侦测。
原子吸收光度计分析中影响测量条件的可变因素多,在测量同种样品的各种测量条件不同时,对测定结果的准确度和灵敏度影响很大。选择合适的工作条件,能有效地消除干扰因素,可得到好的测量结果和灵敏度。
1、吸收波长(分析线)的选择:通常选用共振吸收线为分析线,测量高含量元素时,可选用灵敏度较低的非共振线为分析线。如测zn时常选用灵敏的213.9nm波长,但当zn的含量高时,为保证工作曲线的线性范围,可改用次灵敏线307.5nm波长进行测量。as,se等共振吸收线位于200nm以下的远紫外区,火焰组分对其明显吸收,故用火焰原子吸收法测定这些元素时,不宜选用共振吸收线为分析线。测hg时由于共振线184.9nm会被空气强烈吸收,只能改用此灵敏线253.7nm测定。
2、光路准直在分析之前,必须调整空心阴极灯光的发射与检测器的接受位置,保证提供尽可能大的测量能量。
3、狭缝宽度的选择狭缝宽度影响光谱通带宽度与检测器接受的能量。调节不同的狭缝宽度,测定吸光度随狭缝宽度而变化,当有其它谱线或非吸收光进入光谱通带时,吸光度将立即减少。不引起吸光度减少的狭缝宽度,即为应选取得适合狭缝宽度。对于谱线简单的元素,如碱金属、碱土金属可采用较宽的狭缝以减少灯电流和光电倍增管高压来提高信噪比,增加稳定性。对谱线复杂的元素如铁、钴、镍等,需选择较小的狭缝,防止非吸收线进入检测器,来提高灵敏度,改善标准曲线的线性关系。
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