黑胶虫污染是一个老生常谈的话题。目前,科研界对黑胶虫的污染特征没有统一的判定标准,通常污染特征总结有:
1)活跃游动或旋转梭动或原地颤动(如视频1、2、3所示);
视频1 活跃游动
视频2 旋转梭动
视频3 原地颤动
2)呈杆状、球状、卵圆状;
3)培养基不浑浊;
4)复苏或传代时往往会出现黑胶虫污染,并且与细胞呈现此消彼长的现象。
我们对多个黑胶虫样本进行测序鉴定,这里举两个典型鉴定结果给大家分享:
图1 sphingomonas(鞘氨醇单胞菌)单个及菌落图
属名
样本2,15,21,27鉴定为sphingomonas sp.(鞘氨醇单胞菌属)
能否游动
以单侧生极性鞭毛运动
类别
g-菌
形状
杆状;菌落为黄色
大小
0.3-0.8 * 1.0-2.7µm
特点
该菌属至今共有12个种,是一类丰富的新型微生物资源,可用于芳香化合物的生物降解,在环境保护及工业生产方面具有巨大的应用潜力
分布范围
河水、根际、地表及深层的地下的沉积物、海洋,连极地土壤中都有它们的踪迹
图2 brevundimonas vesicularis(泡囊假单胞菌)单个及菌落图
属名
样本4,19鉴定为brevundimonas vesicularis(泡囊假单胞菌)属于brevundimonas sp.(短波单胞菌属)
类别
g-菌
形状
杆状;菌落为圆形,凸起,表面湿润光滑,边缘整齐
大小
0.4-0.5x 1-2μm
代表种
泡囊短波单胞菌是一种较罕见的非发酵性病原性假单胞菌,在人体可引起肺炎、败血症、皮肤炎症和坏死性蜂窝织炎等
分布范围
通常存在于土壤、河流等自然界中
这些黑胶虫样本被鉴定为细菌。另外我们也查阅了大批文献,十几年前就有人做了相关研究,很多都鉴定为细菌,例如以下这篇[1]:
图3 客户文献截图
这篇文章讲述的是,首先从黑胶虫污染细胞样本中分离得到黑胶虫,然后从黑胶虫中提取基因组dna进行基因测序及分析,鉴定出的黑胶虫为无色杆菌属(achromobacter)。
细菌已经在地球上存在三十多万年了,具有不同的形状,根据形状主要分为三类,即:球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧菌、螺菌、螺杆菌)(图4)。鞭毛是着生在细菌表面的丝状运动器官。由于鞭毛很细,只有用特殊的染色法,才能用光学显微镜观察到。直径12~25nm,长3~12μm,柔软、波形(图5)。
图4 细菌模式图和细菌形状分类
图5 细菌鞭毛分布图
单生(一根鞭毛着生于一端)
双生(两根鞭毛分别着生于两端)
单丛生(一丛鞭毛着生于一端)
双丛生(两丛鞭毛分别着生于两端)
周生(多根鞭毛遍布于菌体上)
鞭毛有三种运动方式:在液体中泳动,在固体表面上滑行,在液体中旋转梭动。所以难怪,我们看到的黑胶虫不是在液体中活跃游动,就是在液体中旋转梭动,这就和黑胶虫被鉴定为细菌的结果相吻合了。
黑胶虫污染顽固,如何消杀,胞胞巴适有秘方——黑胶虫清除剂,其所含有的多肽活性成分,相比传统抗生素有效清除黑胶虫;清除周期短,视黑胶虫污染程度通常3-6天可有效去除;广谱性强,可有效清除常见支原体污染。
本期讲解就到这了,请持续关注爱必信公众号,等待探秘黑胶虫(下)。
[1] jennifer sue gray, janette marie birmingham, jenifer imig fenton. got black swimming dots in your cell culture? identification of achromobacter as a novel cell culture contaminant[j]. biologicals, 2010, 38(2):273-7.
注:图源网络和客户,仅供参考学习用。
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