支原体检测试剂盒细胞样本的处理妙招
支原体检测试剂盒细胞样本的处理妙招
本试剂盒是利用荧光染料（bisbenzimide,hoechst 33258）检测支原体污染。这种染料会结合到dna的a-t富集区域，因为支原体的dna中a-t含量高（55％～80％），所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点，即为支原体的dna染色斑，说明有支原体污染。hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；hoechst 33258和双链dna结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
贴壁细胞：
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中，接种密度为1-2×104。同时，接种正常无支原体感染的同种细胞，作为阴性对照。
2.5天后，先吸去培养液，再加入1ml的固定液，静置20min，
3.吸去固定液，晾干。
4.于每孔中，加入1ml的hoechst33258工作液（hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置15-20min或室温静置20～30min。
5.吸去hoechst 33258工作液，加入2ml灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
注意事项：
1.hoechst工作液对人体有害，请注意防护。
2.固定液有刺激性气味，建议在通风橱进行固定。
3.支原体检测时，最好用不含抗生素的培养液培养2～3代，这样容易避免假阴性结果。
4.本试剂盒用于6孔板检测时，可以进行50次检测反应。
5.检测支原体污染，可以使用支原体高效vero细胞，这样可以提高检测灵敏度，即将被检测样品接种于vero细胞进行检测。
关键词：荧光显微镜
河北医院污水消毒装置选购指南
喝自家纯粮酿造白酒的好处
史密斯佳士比C8 *
低温高速离心机使用方法
GF78-RE系列旋转蒸发仪技术资料
支原体检测试剂盒细胞样本的处理妙招
植物残茬对土壤酸度的影响
三大安防企业智能家居PK，谁能笑到后？
鼓风干燥箱材质及特征
型材弯曲机的介绍
水热合成反应釜实验操作步骤
高剪切乳化罐的主要用途有哪些？
RTZ-F型调压器特性
HAST高加速应力测试仪在老化测试中的应用
GCE隔膜阀天津现货销售
龙门铣床安全操作规程建议收藏！
石墨烯润滑油乳化设备
压力变送器跟压力传感器的相同点和区别
数控机床由哪几个组成部分各部分的基本功能是
淋雨试验箱的清洁方法及对安装场地的要求
本试剂盒是利用荧光染料（bisbenzimide,hoechst 33258）检测支原体污染。这种染料会结合到dna的a-t富集区域，因为支原体的dna中a-t含量高（55％～80％），所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点，即为支原体的dna染色斑，说明有支原体污染。hoechst 33258的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；hoechst 33258和双链dna结合后，最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
贴壁细胞：
1.被检细胞接种于无菌的6孔细胞培养板中，接种密度为1-2×104。同时，接种正常无支原体感染的同种细胞，作为阴性对照。
2.5天后，先吸去培养液，再加入1ml的固定液，静置20min，
3.吸去固定液，晾干。
4.于每孔中，加入1ml的hoechst33258工作液（hoechst 33258工作液须覆盖全部被检细胞），37℃避光放置15-20min或室温静置20～30min。
5.吸去hoechst 33258工作液，加入2ml灭菌超纯水洗涤三次，直接风干。风干后加入一滴封片液，并以盖玻片覆盖。
6.荧光显微镜观察。用紫外激发光激发，观察细胞周围是否有蓝色荧光小点或串珠状荧光小点。
注意事项：
1.hoechst工作液对人体有害，请注意防护。
2.固定液有刺激性气味，建议在通风橱进行固定。
3.支原体检测时，最好用不含抗生素的培养液培养2～3代，这样容易避免假阴性结果。
4.本试剂盒用于6孔板检测时，可以进行50次检测反应。
5.检测支原体污染，可以使用支原体高效vero细胞，这样可以提高检测灵敏度，即将被检测样品接种于vero细胞进行检测。
关键词：荧光显微镜
河北医院污水消毒装置选购指南
喝自家纯粮酿造白酒的好处
史密斯佳士比C8 *
低温高速离心机使用方法
GF78-RE系列旋转蒸发仪技术资料
支原体检测试剂盒细胞样本的处理妙招
植物残茬对土壤酸度的影响
三大安防企业智能家居PK，谁能笑到后？
鼓风干燥箱材质及特征
型材弯曲机的介绍
水热合成反应釜实验操作步骤
高剪切乳化罐的主要用途有哪些？
RTZ-F型调压器特性
HAST高加速应力测试仪在老化测试中的应用
GCE隔膜阀天津现货销售
龙门铣床安全操作规程建议收藏！
石墨烯润滑油乳化设备
压力变送器跟压力传感器的相同点和区别
数控机床由哪几个组成部分各部分的基本功能是
淋雨试验箱的清洁方法及对安装场地的要求