硫氧还蛋白氧化还原酶（TrxR） 活性测定试剂盒 技术文章
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硫氧还蛋白氧化还原酶（thioredoxin reductase, trxr） 活性测定试剂盒商品货号：qs1110
英文名称：oxidized thioredoxin reductase (trxr) assay kit
别名：硫氧还蛋白氧化还原酶试剂盒 trxr kit 硫氧还蛋白氧化还原酶（trxr）试剂盒 硫氧还蛋白氧化还原酶（trxr）测试盒
检测方法：常量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
qs1110-50管/48样 索桥生物 50管/48样 ￥250.00元
产品详细介绍
测定意义：
trxr是一种nadph依赖的包含fad结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及nadph共同构成了硫氧还蛋白系统。trxr与gr活性类似，催化gssg还原生成gsh，是*氧化还原循环关键酶之一。
测定原理：
trxr催化nadph还原dtnb生成tnb和nadp+，tnb在412 nm有特征吸收峰，通过测定412nm波长处tnb的增加速率，即可计算trxr活性。
产品说明书
货号：qs1110 规格：50 管/48 样
硫氧还蛋白氧化还原酶（thioredoxin reductase, trxr） 活性测定试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
trxr 是一种 nadph 依赖的包含 fad 结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化 还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及 nadph 共同构成了硫氧还蛋白系统。trxr 与 gr 活性类似， 催化 gssg 还原生成 gsh，是*氧化还原循环关键酶之一。
测定原理：
trxr 催化 nadph 还原 dtnb 生成 tnb 和 nadp+，tnb 在 412 nm 有特征吸收峰，通过测定 412nm 波长处 tnb 的增加速率，即可计算 trxr 活性。
自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、低温离心机、可调节移液器、1ml 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 90ml×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 5ml×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5 ml 蒸馏水溶解。
粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加 入 1ml 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时 间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
trxr 测定操作：
1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 412nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂一在 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）预热 30min。
3. 测定管：取 1ml 玻璃比色皿，加入 100μ l 试剂二，100μ l 试剂三，700μ l 试剂一，100μ l 上清液，迅速混匀后于 412 nm 测定 10 s 和 310 s 吸光度，记为 a3 和 a4。△a 测定管=a2-a1。
trxr 活性计算公式：
(1). 按蛋白浓度计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每毫克蛋白每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单位。
trxr（nmol/min /mg prot）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷(cpr×v 样)÷t = 147×△a 测定管÷cpr
(2). 按样本质量计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每克样本每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单位。
trxr（nmol/min /g 鲜重）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷(w×v 样÷v 样总)÷t= 147×△a 测定管÷w
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每 104个细胞每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单 位。
trxr（nmol/min/104 cell）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷(细胞数量×v 样÷v 样总)÷t = 147×△a 测定管÷ 细胞数量
（4）按液体体积计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每毫升液体每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单位。
trxr（nmol/min /ml）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷v 样÷t = 147×△a 测定管
ε ：tnb 在 412nm 处的微摩尔消光系数，0.0136 l/μ mol/cm；d：比色皿光径，1cm；v 反总： 反应体系总体积（l），1000μ l=0.001 l；cpr：上清液蛋白质浓度（mg/ml），需要另外测定； v 样：加入反应体系中上清液体积（ml），100μ l=0.1 ml；v 样总：加入提取液体积，1ml；w， 样本质量，g；t：反应时间（min），5 min。
注意事项:
1. 测定前须先取 1～2 个样做预实验，哺乳动物组织及血液制品 trxr 活力测定时，一般须用 蒸馏水稀释 5 倍左右；测定过程操作须迅速。
2. 试剂二和试剂三配制好后 3 天内使用完。
系列产品及单价
辅酶ⅱ系列
qs1100 辅酶ⅱnadp(h)含量测试盒 可见分光光度法 50管/24样 550
ms1100 辅酶ⅱnadp(h)含量测试盒 微量法 100管/48样 1000
qs1101 nadp磷酸酶（nadpase）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 520
ms1101 nadp磷酸酶（nadpase）测试盒 微量法 100管/96样 980
qs1102 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（g6pdh）/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 160
ms1102 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（g6pdh）/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测试盒 微量法 100管/96样 300
qs1103 胞浆异柠檬酸脱氢酶（icdhc）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 260
ms1103 胞浆异柠檬酸脱氢酶（icdhc）测试盒 微量法 100管/96样 500
qs1104 nadp苹果酸酶（nadp-me）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 320
ms1104 nadp苹果酸酶（nadp-me）测试盒 微量法 100管/96样 600
qs1105 nad-苹果酸酶（nad-me）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 350
ms1105 nad-苹果酸酶（nad-me）测试盒 微量法 100管/96样 650
qs1106 6-磷酸葡糖糖酸脱氢酶（6pgdh）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 750
ms1106 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶（6pgdh）测试盒 微量法 100管/96样 1400
qs1107 肌酸激酶(ck)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 820
ms1107 肌酸激酶(ck)测试盒 微量法 100管/96样 1500
qs1108-10 脂肪酸合成酶（fas）测试盒 紫外分光光度法 10管/9样 1200
qs1108-25 脂肪酸合成酶（fas）测试盒 紫外分光光度法 25管/24样 2000
qs1108-50 脂肪酸合成酶（fas）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 3200
ms1108 脂肪酸合成酶（fas）测试盒 微量法 100管/96样 6000
qs2508 蔗糖磷酸化酶(sp)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 1600
ms2508 蔗糖磷酸化酶(sp)测试盒 微量法 100管/96样 3000
qs1110 硫氧还蛋白氧化还原酶（trxr）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 250
ms1110 硫氧还蛋白氧化还原酶（trxr）测试盒 微量法 100管/96样 450
qs1111 *还原酶（gr）测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 260
ms1111 *还原酶（gr）测试盒 微量法 100管/96样 500
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别名：硫氧还蛋白氧化还原酶试剂盒 trxr kit 硫氧还蛋白氧化还原酶（trxr）试剂盒 硫氧还蛋白氧化还原酶（trxr）测试盒
检测方法：常量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
qs1110-50管/48样 索桥生物 50管/48样 ￥250.00元
产品详细介绍
测定意义：
trxr是一种nadph依赖的包含fad结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及nadph共同构成了硫氧还蛋白系统。trxr与gr活性类似，催化gssg还原生成gsh，是*氧化还原循环关键酶之一。
测定原理：
trxr催化nadph还原dtnb生成tnb和nadp+，tnb在412 nm有特征吸收峰，通过测定412nm波长处tnb的增加速率，即可计算trxr活性。
产品说明书
货号：qs1110 规格：50 管/48 样
硫氧还蛋白氧化还原酶（thioredoxin reductase, trxr） 活性测定试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
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测定原理：
trxr 催化 nadph 还原 dtnb 生成 tnb 和 nadp+，tnb 在 412 nm 有特征吸收峰，通过测定 412nm 波长处 tnb 的增加速率，即可计算 trxr 活性。
自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、低温离心机、可调节移液器、1ml 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体 90ml×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 5ml×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 5 ml 蒸馏水溶解。
粗酶液提取：
1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加 入 1ml 试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时 间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
trxr 测定操作：
1. 分光光度计预热 30 min，调节波长到 412nm，用蒸馏水调零。
2. 试剂一在 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）预热 30min。
3. 测定管：取 1ml 玻璃比色皿，加入 100μ l 试剂二，100μ l 试剂三，700μ l 试剂一，100μ l 上清液，迅速混匀后于 412 nm 测定 10 s 和 310 s 吸光度，记为 a3 和 a4。△a 测定管=a2-a1。
trxr 活性计算公式：
(1). 按蛋白浓度计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每毫克蛋白每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单位。
trxr（nmol/min /mg prot）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷(cpr×v 样)÷t = 147×△a 测定管÷cpr
(2). 按样本质量计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每克样本每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单位。
trxr（nmol/min /g 鲜重）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷(w×v 样÷v 样总)÷t= 147×△a 测定管÷w
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：在 25℃或者 37℃中，每 104个细胞每分钟催化 1nmol dtnb 还原为 1 个酶活单 位。
trxr（nmol/min/104 cell）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷(细胞数量×v 样÷v 样总)÷t = 147×△a 测定管÷ 细胞数量
（4）按液体体积计算
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trxr（nmol/min /ml）=△a 测定管÷ε ÷d×v 反总÷v 样÷t = 147×△a 测定管
ε ：tnb 在 412nm 处的微摩尔消光系数，0.0136 l/μ mol/cm；d：比色皿光径，1cm；v 反总： 反应体系总体积（l），1000μ l=0.001 l；cpr：上清液蛋白质浓度（mg/ml），需要另外测定； v 样：加入反应体系中上清液体积（ml），100μ l=0.1 ml；v 样总：加入提取液体积，1ml；w， 样本质量，g；t：反应时间（min），5 min。
注意事项:
1. 测定前须先取 1～2 个样做预实验，哺乳动物组织及血液制品 trxr 活力测定时，一般须用 蒸馏水稀释 5 倍左右；测定过程操作须迅速。
2. 试剂二和试剂三配制好后 3 天内使用完。
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