hyclone胎牛血清是实验室常用的天然培养基,但不能直接使用。无论是存储还是使用,都比较复杂。血清的常规处理是热钝化,即置于56°水浴中30分钟;其目的是使血清中的补体成分和一些未知的细胞生长抑制分子失活。
实验表明,大多数细胞不需要经过正确处理后的热灭活血清。经过这样的处理,血清只能轻微促进细胞的生长,或者根本没有作用。即使是高温处理通常也会影响血清的质量并降低细胞的生长速度。热处理过的血清会显着增加沉淀物的形成。在倒置显微镜下观察时,这些沉淀物,如“小黑点”,常常使研究人员误认为血清被污染了,而将血清置于37℃的环境中会增加这种沉淀物,使研究人员误认为是它是微生物的分裂和扩张。如果没有必要,可以不需要热处理。不仅节省时间,还保证了精华液的质量!
透析治疗可以从hyclone胎牛血清中去除所有分子量小于10000da的分子。例如,可以去除激素、细胞因子、葡萄糖、氨基酸和许多其他分子。透析还可以从血清中去除抗生素和其他内源性分子。
hyclone胎牛血清的常规灭菌方法是多次通过0.1um滤膜以消除微生物污染,而伽马射线照射可以灭活牛体内常见的病毒。但是,某些类型的病毒可以抵抗伽马辐射,例如细小病毒。
需要注意的是,血清一般在-5°到-20°之间冷冻,在2°到8°之间融化。更好的方法是将血清分装到50ml的试管中,避免反复冻融对血清造成的伤害。血清融化后常出现沉淀,可能是血清蛋白变性所致。沉淀物可以通过短暂的离心去除,这些沉淀物一般不会影响血清的质量。
hyclone胎牛血清是细胞培养中用量的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余酶失活,保护细胞不受伤害。
关键词:倒置显微镜
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