如何延长uplc柱寿命关于流动相
选择优质的色谱级流动相溶剂;确保使用超纯水,纯化水系统应始终处于良好的工作状态;通道中避免使用100%水相,如含有5-10%有机相就可显著抑菌; 如果必须使用100%水相,则每24-48小时必须新鲜配制、* 更换(含溶剂瓶);对流动相水溶液部分使用0.2 µm过滤膜过滤(*使用:沃特世p/n:186003524 0.2 µm 47 mm ghp膜)。关于样品制备
样品溶液中的微粒会堵塞系统管路或色谱柱,可使用高速离心和/或用0.2 µm过滤膜过滤样品,确保滤膜与样品溶液兼容(*使用:沃特世 p/n: wat097962,针式过滤膜ghp;或垂询我们);
确保样品与流动相体系兼容,进样后不会发生沉淀;较脏的样品,容易造成色谱柱污染,使用适合的固相萃取小柱对样品进行净化处理。清洗与再生
亲水作用色谱柱操作建议(cortecs hilic、beh hilic、beh amide)
亲水作用色谱柱的使用方法与反相色谱柱有很大的不同,需要加以
注意。(关于hilic,请访问waters.con/hilic,并参考《hilic 综合指南》,715002531zh)。
样品制备
应尽可能使用较高比例的有机溶剂(如95%乙腈),以避免溶剂效应。如果存在样品溶解问题,应至少使用50/50乙腈/水,并减少进样体积。柱平衡
初次使用时,先用50倍柱体积的50/50乙腈/水(cortecs hilic, beh hilic,如果流动相条件含有缓冲盐则需添加10 mm流动相缓冲盐)或60/40乙腈/水(beh amide)对柱进行老化;开始进样前,用20倍柱体积的起始流动相条件进行平衡;如果使用梯度条件,每次梯度之间,用8-10倍柱体积的起始流动相条件再次平衡。没有充分老化平衡的色谱柱,将会出现柱效较低、以及保留时间漂移的问题。柱清洗再生
对于acquity uplc beh hilic与cortecs hilic色谱柱,用50/50乙腈/水清洗以去除极性污染物。如果不能解决问题,用5/95
的乙腈/水冲洗;
对于acquity uplc amide色谱柱,可采用10分钟的梯度洗脱从100%有机相到100%水相。值得注意的是当水相比例升高,压力将迅速增加,当水相比例超过60%时需降低流速。如果有必要可重复清洗。柱保存
先将缓冲盐从色谱柱内冲洗干净,然后将色谱柱保存在95/5乙腈/水(beh hilic,cortecs hilic)或100%乙腈(beh amide)中。
过滤膜
沃特世建议您使用0.2 µm的过滤膜对缓冲溶液和样品进行过滤, 以避免颗粒物质堵塞色谱柱和仪器部件。
产品描述
部件编号
0.2 µm, 47 mm ghp溶剂过滤膜(100/包)
186003524
0.2 µm, ghp针式过滤器(100/包)
wat097962
0.2 µm, ghp针式过滤器(300/包)
wat097963
0.2 µm, ghp针式过滤器(1000/包)*
186005595
0.2 µm, pvdf针式过滤器(100/包)**
wat200804
uplc柱配件
1.0 mm uplc 柱入口/出口过滤筛板, 0.2 µm, 3 个/包 700003775
3.0 mm uplc柱入口/出口过滤筛板,0.2 µm,3 个/包 700004790
2.1 mm uplc 柱入口端螺母,1 个/包 700003779
2.1 mm uplc 柱出口端螺母,1 个/包 700003780
1.0 mm uplc 柱入口端螺母,1 个/包 700003777
1.0 mm uplc 柱出口端螺母,1 个/包 700003778
3.0 mm uplc柱出口端螺母,1个/包 700004791
uplc柱的连接acquity uplc系统使用专门设计的可耐受高压并且有
小柱外体积的管路和接头。*的色谱柱进口管路(订货号430001084)是随acquity uplc色谱系统配的,进样阀末端的管路清晰地用蓝色标记标示出来,将这根管路的另一端插入uplc色谱柱的入口端并用5/16英寸的扳手拧紧。关于acquity uplc色谱柱正确的出口管路,请参考acquity uplc系统操作手册的相关检测器部分(订货号71500082502)。
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