色谱柱的“长生不老”xiulian之术—上篇
寿命
色谱柱寿命不理想的问题一直困扰着众多实验室的小伙伴们，针对各品牌色谱柱的寿命表现均低于它们的普遍寿命的情况，不少小伙伴纷纷表示其玻璃心不堪色谱柱年轻即逝的打击。对此，月旭科技为您仔细研究了色谱柱的“长生不老”之术，解决色谱柱寿命不理想的问题，话不多说，快跟随小编脚步一起往下看吧！
月旭科技将为您提供以下解决思路
01 di一步
自查：
1、是否使用同填料保护柱（相同品牌）；
2、流动相从配置到弃用在 12 小时以内；
3、流动相瓶子严格清洗干燥，密封；
4、滤头滤膜材质和品质是否选择错，注意查看是否使用后有溶解现象；
5、使用厂家*的冲洗方式冲洗色谱柱。
02 第二步
以上自查项目改善后均不能解决，则采取第二步：与厂家沟通，建议寄回厂家进行色谱柱“解剖”，月旭科技拥有多年专业“解剖”各种问题色谱柱的经验，为您总结出可能出现的原因如下：
原因一：色谱柱污染
可能出现的原因
1、样品组分吸附在色谱柱的前端
a、可能是由于样品在流动相中的溶解度低而沉淀出来的；
b、样品中有强保留物质（与键合相极性相似的物质）；
c、样品或者流动相中与填料表面发生微弱的不可预知的化学反应；
d、样品溶剂本身的ph值在色谱柱的耐受临界值附近，而且进样体积较大（内径4.6mm，上样体积在 50μl 以上）。
通常这样的情况伴随柱压升高；或者柱压正常，一个色谱图中出现有些峰形异常，有些峰形正常的情况。
解决方法
a、尽量从根源上解决问题，选择合适的样品前处理技术，去除掉强保留物质，获得更加“干净”更加成分单一的样品；
b、使用保护柱，保护柱的选择尽量与分析柱同等填料，同等键合方法的保护柱，如果使用不同品牌填料、不同装填工艺的保护柱，在分离能力和保护方面可能得不到zh的效果，也不要使用更大粒径的保护柱，更大粒径或者装填较差的保护柱会因为它的峰展宽作用而导致分离能力下降。
2、流动相“脏”了
流动相在色谱柱中的使用量比样品要大得多，不停的冲刷色谱柱，如果流动相变质或者有其他的污染物，那对色谱柱的污染会比样品更大，色谱柱对流动相反而是一种净化，而且在运行梯度时，还会出现鬼峰。
解决方法
a、流动相配置后尽快使用，多不超过 12 小时；
b、有机相和盐相混合的流动相，更容易导致盐的析出，尽量使用在线混合，且在运行梯度时变化速率不宜太快，避免盐析出；
c、用专业的经过钝化处理过的溶剂瓶装流动相，切忌不能使用塑料瓶，做好密封，在更换流动相的时候同时更换试剂瓶；
d、水在接触空气或者离开制水设备以后会出现变质，现用现制，打开后尽快使用。
原因二 固定相损坏
由色谱条件的多方面作用而导致的固定相损坏，是目前的色谱技术不能解决的一个问题。一般情况下小基团键合相更容易被水解而脱落，加快了键合相的脱落。硅胶裸露以后暴露在流动相中，增加了盐等对硅胶骨架的攻击，导致骨架变薄，机械强度降低，表现为柱头塌陷。
可能出现的原因
a、流动相中的盐，尤其是磷酸类的缓冲盐，对硅胶的攻击是较强的；
b、高柱温，加快盐运动的速率；
c、高氧，流动相中未排除的氧，会加快硅胶内部键的断裂；
d、高ph（＞8），oh 根离子攻击硅胶内部的 si-o-si 键，导致硅胶直接破碎；
e、低 ph（＜2），h 根离子攻击硅胶表面的 si-c 键，键合相脱落以后，硅胶裸露出来；
f、高水，也是引起键合相水解硅胶裸露的重要诱因。
解决方法
a、使用盐的时候，柱温 ≤30℃；
b、盐的浓度使用在 50mmol 以下；
c、使用在线脱气机或者超声脱气（10 分钟，时间太久会发热导致流动相成分改变）；
d、除了特殊标注，色谱柱的使用 ph 值在 2-8 之间，如果样品溶解的 ph 较苛刻，请使用保护柱来抵御 ph 所带来的损伤，并及时更换；
e、不要把未标注能耐受纯水的色谱柱使用在水相大于 95% 的流动相条件下。
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自查：
1、是否使用同填料保护柱（相同品牌）；
2、流动相从配置到弃用在 12 小时以内；
3、流动相瓶子严格清洗干燥，密封；
4、滤头滤膜材质和品质是否选择错，注意查看是否使用后有溶解现象；
5、使用厂家*的冲洗方式冲洗色谱柱。
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a、可能是由于样品在流动相中的溶解度低而沉淀出来的；
b、样品中有强保留物质（与键合相极性相似的物质）；
c、样品或者流动相中与填料表面发生微弱的不可预知的化学反应；
d、样品溶剂本身的ph值在色谱柱的耐受临界值附近，而且进样体积较大（内径4.6mm，上样体积在 50μl 以上）。
通常这样的情况伴随柱压升高；或者柱压正常，一个色谱图中出现有些峰形异常，有些峰形正常的情况。
解决方法
a、尽量从根源上解决问题，选择合适的样品前处理技术，去除掉强保留物质，获得更加“干净”更加成分单一的样品；
b、使用保护柱，保护柱的选择尽量与分析柱同等填料，同等键合方法的保护柱，如果使用不同品牌填料、不同装填工艺的保护柱，在分离能力和保护方面可能得不到zh的效果，也不要使用更大粒径的保护柱，更大粒径或者装填较差的保护柱会因为它的峰展宽作用而导致分离能力下降。
2、流动相“脏”了
流动相在色谱柱中的使用量比样品要大得多，不停的冲刷色谱柱，如果流动相变质或者有其他的污染物，那对色谱柱的污染会比样品更大，色谱柱对流动相反而是一种净化，而且在运行梯度时，还会出现鬼峰。
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a、流动相配置后尽快使用，多不超过 12 小时；
b、有机相和盐相混合的流动相，更容易导致盐的析出，尽量使用在线混合，且在运行梯度时变化速率不宜太快，避免盐析出；
c、用专业的经过钝化处理过的溶剂瓶装流动相，切忌不能使用塑料瓶，做好密封，在更换流动相的时候同时更换试剂瓶；
d、水在接触空气或者离开制水设备以后会出现变质，现用现制，打开后尽快使用。
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可能出现的原因
a、流动相中的盐，尤其是磷酸类的缓冲盐，对硅胶的攻击是较强的；
b、高柱温，加快盐运动的速率；
c、高氧，流动相中未排除的氧，会加快硅胶内部键的断裂；
d、高ph（＞8），oh 根离子攻击硅胶内部的 si-o-si 键，导致硅胶直接破碎；
e、低 ph（＜2），h 根离子攻击硅胶表面的 si-c 键，键合相脱落以后，硅胶裸露出来；
f、高水，也是引起键合相水解硅胶裸露的重要诱因。
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a、使用盐的时候，柱温 ≤30℃；
b、盐的浓度使用在 50mmol 以下；
c、使用在线脱气机或者超声脱气（10 分钟，时间太久会发热导致流动相成分改变）；
d、除了特殊标注，色谱柱的使用 ph 值在 2-8 之间，如果样品溶解的 ph 较苛刻，请使用保护柱来抵御 ph 所带来的损伤，并及时更换；
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