小鼠白细胞介素 4(IL-4)ELISA检测试剂盒检测原理

小鼠白细胞介素 4(il-4)elisa检测试剂盒检测原理
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先包被小鼠白细胞介素 4(il-4)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物tmb显色,tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白细胞介素 4(il-4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(od 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:edta、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂盒性能
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数r值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:检测浓度小于1.0 pg/ml。
3.检测范围:5 pg/ml - 160 pg/ml 。
4.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
5.重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
6.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
7.有效期:6个月
小鼠白细胞介素 4(il-4)elisa检测试剂盒检测原理

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