分子杂交原理

分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中项基本的实验技术。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的 dna(或rna)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在dna与dna链之间,也可在rna与dna链之间形成。核酸分子杂交是基因诊断的基本的方法之。它的基本原理是:互补的dna单链能够在定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在dna和dna之间进行,也能在dna和rna之间进行。因此,当用段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组dna接触时,如果两者的碱基*配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组dna中含有已知的基因序列。由此可见,进行基因检测有两个必要条件,是必需的特异的dna探针;是必需的基因组dna。当两者都变性呈单链状态时,就能进行分子杂交。
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