液相色谱仪测定食品中八种人工着色剂色素的含量
着色剂又称食品色素，是以食品着色为主要目的，使食品赋予色泽和改善食品色泽的物质。目前世界上常用的食品着色剂有60余种，我国允许使用的有46种，按来源来分，可把着色剂分为两大类：一为天然着色剂二为人工合成着色剂。
生产企业违禁添加着色剂、甜味剂，长期食用此类产品将严重危害人体健康。实验用乙醇-氨水提取样品中的人工合成着色剂，利用固相萃取柱净化，采用液相色谱仪（二级阵列检测器）测定样品中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红等人工合成着色剂的含量。
实验仪器
lc600a梯度液相色谱系统（二级阵列检测器）（南京科捷分析仪器有限公司）、离心机、固相萃取装置等。
样品处理：
1.提取 将试样用匀浆机打碎，再搅拌均匀，准确称取2.00 g样品，装入离心管中。加10 ml无水乙醇-氨水溶液，涡旋0.5 min，再3000rpm离心10 min，将上清液倒入塞有脱脂棉的玻璃漏斗中过滤，将剩余残渣再重复操作三次，将收集的滤液（约40ml）置于80℃水浴中浓缩至约2 ml。
2.净化 将浓缩后的试样溶液用2%的氨水调成ph=8后，转移到预处理过的固相萃取柱中，依次用3 ml ph=8的水和3 ml ph=8的50%甲醇以小于2ml/min的流速清洗，弃去全部流出液。再用10ml盐酸-乙醇溶液（1+9）将着色剂洗脱出固相萃取柱，收集洗脱液，用氨水中和，80℃水浴浓缩至近干，冷却后用50%的甲醇溶液溶解并定容至10ml，过滤后取续滤液待测。
色谱条件：
色谱柱 c18柱（250mm×4.6mm，5μm）
流动相 a：甲醇；b：乙酸铵溶液（0.02mol/l）
流速 1.0ml/min
进样量 10μl
检测波长 柠檬黄428nm、苋菜红521nm、靛蓝608nm、胭脂红509nm、日落黄483nm、诱货红507nm、亮蓝625nm、赤藓红529nm
梯度洗脱程序 时间min 甲醇% 乙酸铵溶液%
0 20 80
5 35 65
10 80 20
16 80 20
17 20 80
2 20 80
关键词：液相色谱仪 离心机 固相萃取装置 匀浆机
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lc600a梯度液相色谱系统（二级阵列检测器）（南京科捷分析仪器有限公司）、离心机、固相萃取装置等。
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1.提取 将试样用匀浆机打碎，再搅拌均匀，准确称取2.00 g样品，装入离心管中。加10 ml无水乙醇-氨水溶液，涡旋0.5 min，再3000rpm离心10 min，将上清液倒入塞有脱脂棉的玻璃漏斗中过滤，将剩余残渣再重复操作三次，将收集的滤液（约40ml）置于80℃水浴中浓缩至约2 ml。
2.净化 将浓缩后的试样溶液用2%的氨水调成ph=8后，转移到预处理过的固相萃取柱中，依次用3 ml ph=8的水和3 ml ph=8的50%甲醇以小于2ml/min的流速清洗，弃去全部流出液。再用10ml盐酸-乙醇溶液（1+9）将着色剂洗脱出固相萃取柱，收集洗脱液，用氨水中和，80℃水浴浓缩至近干，冷却后用50%的甲醇溶液溶解并定容至10ml，过滤后取续滤液待测。
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检测波长 柠檬黄428nm、苋菜红521nm、靛蓝608nm、胭脂红509nm、日落黄483nm、诱货红507nm、亮蓝625nm、赤藓红529nm
梯度洗脱程序 时间min 甲醇% 乙酸铵溶液%
0 20 80
5 35 65
10 80 20
16 80 20
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