液相色谱仪分析 定量与方证的完善

一旦完成了液相色谱仪检测方法建立,应对其进行论证,进行全面论证通常需通过简略核查方法的专属性、线性、准确性、精密度、回收率、灵敏度等而实施。在zui终论证方法之前,应准备和检查书面分析方案,使之清晰、严密。实际的论证程序按方法的重要性不同,需时为1天一2周不等。理想的情况是,通过方证能找出可能因仪器和操作者的不同而导致的潜在问题。
在日常hplc分析中,柱间重现性可能是主要问题之一。同种方法在不同批号的色谱柱上可能有不同的结果,任何意外的结果都应进行研究,以找出其原因,避免在日后的工作中出现同类错误。
完善方法
1.应预备数据表明所需方法的性能;
2.应有为其它操作者使用的书面分析步骤;
3.以一个以上的系统或操作者,用包括期望组分和期望被测物浓度的样品系统地论证方法的性能;比较不同时间和不同实验室之间的实验数据;
4.应得到色谱柱的期望寿命以及柱间重现性的数据;
5.研究不正常的结果,以纠正潜在的问题;
6.研究所有影响分离的条件(温度、流动相组成、ph等);
规定这些条件的限度;对可能发生的问题(关键谱峰对分离不足;随运行时间延长,zui末谱峰保留值增加等)提出建议措施。
这些条件的要求适用于满足精密准确、稳定可靠并可移植转让的严格hplc标准方法。在其它情况下,可能只要求一次成功的分离或能快速、“粗略地答复某一特定问题,此时可部分许多建议,仅明白并知道一个方法建立方案的真实目标就足够了。
关键词:液相色谱仪 色谱柱

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