新型复合模式色谱柱检测极性有机酸
近年来，有机酸的使用在制药和食品领域越来越普遍，在食品中常用的有机酸主要有乳酸，柠檬酸，酒石酸，苹果酸等，常被作为营养物质。在制药领域，常用的有机酸主要有乙酸、三氟yi酸、甲酸等，常被作为有机合成的原料，因此不管是食品还是制药领域有机酸的检测都是有关部门重点关注的课题。
有机酸是一类广泛存在于自然界的有机物，很多样品基体中都已测出不同种类不同含量的有机酸。目前常用测定方法有 hplc 法、 ic 法和衍生化 gc 方法。
目前液相色谱法（hplc）是有机酸广泛的检测方法，其分离模式是与检测方法多种多样，可以根据样品的构成与性质来选择合适的色谱条件，有机酸在水中很容易发生电离，产生多峰现象。为了使有机酸尽可能的以分子形式存在，一般使用酸性流动相来抑制有机酸的解离。通常在流动相中加入磷酸盐缓冲液、冰醋酸、磷酸等，但小分子有机酸由于极性较强，通常在c18色谱柱上保留较弱，分离较差，本实验使用新型复合模式色谱柱，建立了3种有机酸的液相色谱分析方法，可得到良好的分析结果。
样品处理：
称取多肽药物样品20mg于10ml具塞比色管中，加水至10ml，超声提取20min，取适量样品在10000rpm下高速离心15min，取上清液过0.45μm的滤膜后作为待测溶液。
色谱条件
复合模式色谱柱原理：
acclaim®mixed-mode wax-1色谱柱基于新型混合模式硅胶填料，具有疏水和弱阴离子交换性能。与传统的反相固定相不同，新型填料具有带可电离末端的烷基长链，并且具有很大的潜力，可用于分离各种含有混合物的阴离子化合物，包括药物，食品和饮料，化学品等。
实验结果：
采用上述仪器分析方法，对3种有机酸进行线性范围测试，线性相关系数r2均大于0.999，线性关系良好。3种有机酸线性范围、线性相关系数、lod（s/n>3）及loq（s/n>10)结果见表1，化合物线性方程图见图1。
标准品及样品分析:
图2.3种有机酸标准品谱图（浓度100μg/ml）
图3.多肽药物样品及3种有机酸标准品对比谱图
多肽原料药在合成过程中使用了乙酸、三氟yi酸，需要对乙酸及三氟yi酸的含量进行控制，所以对多肽样品中乙酸、三氟yi酸残留量进行测定,在实际样品测试中，乙酸被检出，其他物质未被检出，经计算乙酸在样品中浓度为5.6ug/ml,含量为0.28%，符合*。
结论:
本文建立了液相色谱方法结合新型复合模式色谱柱对3种有机酸的检测方法。由实验结果可以看出，基于thermo fisher ultimate 3000 液相色谱仪结合acclaim® mixed-mode wax-1 色谱柱的检测方法具有优异的灵敏度、稳定性和线性范围，可用于有机酸在制药和食品领域的常规分析检测。
更多产品信息请点击：液相色谱法（hplc）
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目前液相色谱法（hplc）是有机酸广泛的检测方法，其分离模式是与检测方法多种多样，可以根据样品的构成与性质来选择合适的色谱条件，有机酸在水中很容易发生电离，产生多峰现象。为了使有机酸尽可能的以分子形式存在，一般使用酸性流动相来抑制有机酸的解离。通常在流动相中加入磷酸盐缓冲液、冰醋酸、磷酸等，但小分子有机酸由于极性较强，通常在c18色谱柱上保留较弱，分离较差，本实验使用新型复合模式色谱柱，建立了3种有机酸的液相色谱分析方法，可得到良好的分析结果。
样品处理：
称取多肽药物样品20mg于10ml具塞比色管中，加水至10ml，超声提取20min，取适量样品在10000rpm下高速离心15min，取上清液过0.45μm的滤膜后作为待测溶液。
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实验结果：
采用上述仪器分析方法，对3种有机酸进行线性范围测试，线性相关系数r2均大于0.999，线性关系良好。3种有机酸线性范围、线性相关系数、lod（s/n>3）及loq（s/n>10)结果见表1，化合物线性方程图见图1。
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图3.多肽药物样品及3种有机酸标准品对比谱图
多肽原料药在合成过程中使用了乙酸、三氟yi酸，需要对乙酸及三氟yi酸的含量进行控制，所以对多肽样品中乙酸、三氟yi酸残留量进行测定,在实际样品测试中，乙酸被检出，其他物质未被检出，经计算乙酸在样品中浓度为5.6ug/ml,含量为0.28%，符合*。
结论:
本文建立了液相色谱方法结合新型复合模式色谱柱对3种有机酸的检测方法。由实验结果可以看出，基于thermo fisher ultimate 3000 液相色谱仪结合acclaim® mixed-mode wax-1 色谱柱的检测方法具有优异的灵敏度、稳定性和线性范围，可用于有机酸在制药和食品领域的常规分析检测。
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