液相色谱仪有多种不同的分离机制
液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。具有、快速、灵敏等特点。广泛应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。
按照分离机制不同，液相色谱可分为液-液色谱法、液-固色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法和空间排除色谱法等。
(1) 液-液色谱
又称液-液分配色谱。在液-液色谱中，一个液相作为流动相，另一个液相则分散在很细的惰性载体或硅胶上作为固定相。根据固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法和反相色谱法。
正相色谱法——流动相极性小于固定相极性，即采用极性键合相，用非极性或极性小的溶剂（如烃类）并加入适量的极性溶剂（如氯仿、醇等）为流动相，常用于分离中等极性化合物（如*、甾族、芳香醇、芳香胺、脂、有机氯农药等）。
反相色谱法——流动相极性大于固定相极性，即采用极性很小的键合固定相，用强极性溶剂为流动相（如甲醇/水，乙*/水，水和无机盐的缓冲溶液等），多用于分离多环芳烃等低极性化合物。
(2) 液-固色谱
固定相为固体吸附剂，根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分离。常用的固定相是表面多孔和全多孔微粒型硅胶、氧化铝等，一般采用5~10μm的全多孔型微粒。其特别适用于非离子的、不溶于水的化合物以及几何异构体的分离。
(3) 离子交换色谱法
固定相为离子交换剂，常用基质为合成树脂及硅胶两种，流动相为盐类的缓冲液。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换，根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离，而且广泛地应用于有机和生物物质，如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。
(4) 离子对色谱法
将一种（或数种）与溶质分子电荷相反的离子（称为对离子或反离子）加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成离子对，从而控制离子的保留值的色谱法。离子对色谱法也可分为正相离子对色谱法和反相离子对色谱法，其中反相离子对色谱法应用较多，它是以非极性烷基键合相为固定相，含低浓度反离子的水溶性缓冲溶液为流动相，适用于极性较小的样品分离。
(5) 空间排阻色谱法
空间排阻色谱法是按分子尺寸的差异进行分离的一种液相色谱法，也称凝胶色谱法。其固定相是一种表面惰性，含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质，流动相是可以溶解样品的溶剂，它的选择决定于固定相类型。空间排阻色谱可用于分离相对分子质量大的分子（如蛋白质、核酸等）。
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(1) 液-液色谱
又称液-液分配色谱。在液-液色谱中，一个液相作为流动相，另一个液相则分散在很细的惰性载体或硅胶上作为固定相。根据固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法和反相色谱法。
正相色谱法——流动相极性小于固定相极性，即采用极性键合相，用非极性或极性小的溶剂（如烃类）并加入适量的极性溶剂（如氯仿、醇等）为流动相，常用于分离中等极性化合物（如*、甾族、芳香醇、芳香胺、脂、有机氯农药等）。
反相色谱法——流动相极性大于固定相极性，即采用极性很小的键合固定相，用强极性溶剂为流动相（如甲醇/水，乙*/水，水和无机盐的缓冲溶液等），多用于分离多环芳烃等低极性化合物。
(2) 液-固色谱
固定相为固体吸附剂，根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分离。常用的固定相是表面多孔和全多孔微粒型硅胶、氧化铝等，一般采用5~10μm的全多孔型微粒。其特别适用于非离子的、不溶于水的化合物以及几何异构体的分离。
(3) 离子交换色谱法
固定相为离子交换剂，常用基质为合成树脂及硅胶两种，流动相为盐类的缓冲液。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换，根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离，而且广泛地应用于有机和生物物质，如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。
(4) 离子对色谱法
将一种（或数种）与溶质分子电荷相反的离子（称为对离子或反离子）加到流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成离子对，从而控制离子的保留值的色谱法。离子对色谱法也可分为正相离子对色谱法和反相离子对色谱法，其中反相离子对色谱法应用较多，它是以非极性烷基键合相为固定相，含低浓度反离子的水溶性缓冲溶液为流动相，适用于极性较小的样品分离。
(5) 空间排阻色谱法
空间排阻色谱法是按分子尺寸的差异进行分离的一种液相色谱法，也称凝胶色谱法。其固定相是一种表面惰性，含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质，流动相是可以溶解样品的溶剂，它的选择决定于固定相类型。空间排阻色谱可用于分离相对分子质量大的分子（如蛋白质、核酸等）。
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