PBS缓冲液配制方法

pbs是磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline）一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用的一种缓冲液，主要成分为na2hpo4、kh2po4、nacl和kcl，由于na2hpo4和kh2po4它们有二级解离，缓冲的ph值范围很广；而nacl和kcl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要pbs还可以补加1 mmol/l cacl2和0.5 mmol/l mgcl2，以提供双价阳离子（注：pbs不是磷酸缓冲液：phosphate buffer solution，pb）。pbs缓冲液应高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。pbs缓冲液由水、氯化钠、弱酸kh2po4和共轭碱na2hpo4配制而成，通常将ph调至ph7.4。人体的ph值介于7.35至7.45之间，平均值为7.40。此外，pbs缓冲液还模拟了人体渗透压和离子浓度。由于它对细胞无毒，因此被广泛用于洗涤细胞、组织运输和稀释。尤其在动物细胞培养实验中，常用于胰酶消化细胞前的细胞洗涤，*去除血清。
pbs缓冲液的作用不仅仅如此，仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜ph缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整ph的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应，所以使用pbs是首选。
当然，磷酸缓冲液也不是万能的，有的生物活性物质需要的条件比磷酸缓冲液还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。
配制方法
含0.05%吐温－20的ph7.4的磷酸盐缓冲液(简称为pbs－t)配制方法为：
称取磷酸二氢钾(kh2po4)，磷酸氢二钠(na2hpo4·12h2o)，(kcl)，吐温－20 ，加水。
pbs:phosphate buffered saline
pbs 1l配方ph7.4：磷酸二氢钾(kh2po4)：0.27g，
磷酸氢二钠(na2hpo4)：1.42g，
(nacl)：8g，
kcl)0.2g，
加去离子水约800ml充分搅拌溶解，然后加入浓盐酸调ph至7.4，zui后定容到1l

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