现在,市面上能见到的显色培养基大多用于食品和临床,但himedia厂家生产的显色培养基覆盖面广,能用于供水行业和环境监测站。下面为您介绍一下。
显色培养基的评价常有多个指标,如灵敏度,特异性等,它们也与所检测的样本类型有关。生产厂家经常不提供这些指标。但一些第三方检测中心或研究机构对此则有相关研究,并发表在专业期刊上。
2011年,《学术研究期刊》发表了一篇对显色培养基的比较研究。作者来自埃及研究中心水污染研究部,他们通过用显色培养基检测了水中的单核细胞增生李斯特氏菌,对显色培养基进行了评价(见参考文献1)。
作者指出,单核细胞增生李斯特菌是广泛存在的食品致病菌,致死率较高(>20%)。它从家禽、鳟鱼、壁虱、甲壳类,水、污水、植被、食品中已能被分离出来。对于人类而言,食品和水是常见的致病源。
传统的培养法分离李斯特菌属费力耗时,需要增菌乃至预增菌使水中低丰度的单增李斯特菌得到恢复。显色培养基的出现可改善这一检测方法。
研究者收集了尼罗河地表水的60个水样本。收集水平遵照了200年apha发布的指南。所有水样均收集在无菌的1l玻璃瓶中(simax品牌,捷克共和国产),并在4℃条件下运输到实验室。所有样品在收集后6小时内进行细菌学检查。
研究用的单增李斯特氏菌标准菌株编号为nctc 10890。研究者采用了himedia公司生产的hicrome listeria agar base(以下简称hla)。这款显色培养基基于李斯特菌*的β葡萄糖苷酶与鼠李糖发酵。β葡萄糖苷酶裂解显色底物,使得李斯特菌属菌落呈现蓝色,而其他菌属为白色。李斯特菌的内部鉴别是基于鼠李糖发酵。单核细胞增生李斯特菌为蓝绿色菌落。研究者还采用了另一个公司生产的bbl chromagar显色培养基(以下简称bbl)。
研究遵循了2005年apha指南,采用薄膜过滤法对单核细胞增生李斯特氏菌进行了检测和计数。滤膜放置在培养基上,37℃倒置孵育24小时。对典型菌落计数,单位为cfu/100 ml。菌落的进一步确证采用pcr法。终计算得出灵敏度(真阳性率)、特异性(真阴性率)、总有效率(即(真阳性+真阴性)×100/总数),并进行统计学分析(t检验)。
结果见表1、表2、表3和表4。
表1. 在不同培养基上,单增李斯特氏菌标准菌株的菌落特征
菌株
培养基
阳性菌落
正确数 (%)
假阴性菌落
假阴性数(%)
单核细胞增生李斯特氏菌
hla
蓝绿色
31 (96.9)
白色
1(3.1)
bbl
蓝绿色
30 (93.8)
蓝色至蓝绿色
2(6.2)
表2. 非单增李斯特菌菌株在不同培养基上的菌落情况
菌株
培养基
真阴性结果 (%)
假阳性结果(%)
e. coli o157:h7
hla
10 (100)
0(0.0)
bbl
9 (90.0)
1(10.0)
表3. 培养基分离标准菌株的有效性
hla
bbl
pcr
真阳
31
30
31
真阴
10
9
9
假阳
0
1
1
假阴
1
2
1
灵敏度
96.8%
93.7%
96.8%
特异度
100%
90%
90%
有效率
97.6%
92.8%
95.2%
表4. 60个尼罗河水样在不同培养基上单增李斯特菌的假阳性率
分离株数量
假阳性数(%)
hla
40
2(5.0)
bbl
40
5(12.5)
由上表可见,himedia的李斯特菌显色培养基(hicrome listeria agar base)灵敏度为96.8%,特异度为100%,并已被pcr进一步确证,令人满意,且好于另外一种品牌的显色培养基。作者认为,himedia的李斯特菌显色培养基不失为一种灵敏、快速、特异的方法,并且无须任何确证试验。
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