细胞养得好，血清有门道
血清是细胞培养的必要成分之一，胎牛/新生牛/小牛/成牛种类繁多，加上市场上各种品牌，让细胞小白挑花了眼，小爱围绕以下问题带您一站式了解。
1.血清为何对细胞状态影响如此之大？
2.血清到底如何挑选？
3.絮状物、沉淀、过滤、灭活等使用常见问题？
4.细胞出现问题如何判断是否与血清有关？
血清为何对细胞状态影响如此之大？
血清中含有多种已知和未知的成分，主要包括：蛋白质和多态、多种因子、氨基酸 、激素，其他微量元素及不确定成分。其中生长因子促进细胞增值，附着因子促进细胞贴壁并具有抗胰酶活性，各种蛋白质可提供细胞生长所必需的营养物质，矿物质、脂类及激素也可以结合于血清的蛋白质中，由此可见血清在细胞培养过程中十分关键，其本身存在多种未知成分，采血时间差异，批次之间差异等，综合决定了血清对细胞状态的影响程度。
根据动物来源不同，血清可分为马血清、牛血清、猪血清，还有羊、鸡、兔等动物来源的血清，根据采血时间、血缘品质又分为不同类别，加之不同工艺的加工，市面上可见的血清种类繁多。
爱必信血清
通常马血清用于神经细胞的培养，猪血清用于疫苗生产，新生牛作为乳制品产业中的副产品，其血清产量更高、效益更好，适用细胞范围也更广。
为什么胎牛血清比新生牛血清贵？随着胎龄的增长，补体系统逐渐发育，各种生长因子逐渐减少，进食后的小牛血清中igg含量增多，使血清随着采血时间后移质量相对下降，而且每头胎牛仅能获得约500ml血清，种种因素使得胎牛血清成为细胞培养的的shou选血清，价格也相对更加昂贵。为了满足不同实验需求，产生了适合外泌体研究的去外泌体血清，适合脉冲示踪实验的透析胎牛血清等等，而不同的生产工艺产生了特级、优级、标准级血清。
牛血清根据采血时间不同分类表
类别 来源
胎牛血清 对孕期母牛腹腔穿刺获取
新生牛血清 出生4-6h内未进食进水的新生牛静脉采血
小牛血清 出生后10-90d的小牛静脉采血
成年牛血清 出生超过6个月的牛静脉采血
判断血清质量的四个指标：
依据《中国生物制品主要原辅料质控标准2000年版》
1.有害微生物，不能含有牛腹泻病毒，不能被噬菌体、支原体、真菌污染。
2.内毒素，不应高于10 eu/ml.
3.总蛋白含量，3.5%~5%（w/v），过高可能是由于采血时间较晚，过低血清可能被人为稀释。
4.血红蛋白，从一定程度上反映了采集流程的规范程度。不应高于0.02% (w/v).
此外还流传着通过颜色判断血清质量的方法，小爱认为不够科学，血清颜色由是血红蛋白（红）和胆红素（黄）决定，胎牛尚未全发育，因此其凝血功能不完善，所以采集血清时溶血不可避免，根据血红蛋白是否超标来判断采血过程的规范性更为精准。
絮状物、沉淀、过滤、灭活等使用常见问题？
我们推荐大家养成先4℃解冻，室温或37℃全融解的方法，由于蛋白质等干物质的融解速度大于水这类溶剂，所以我们在血清融解过程中最好多次混匀，避免大量蛋白融于极少部分水，而产生蛋白沉淀。
如果融解血清时出现沉淀也不要着急，产生的沉淀多为脂蛋白和纤维蛋白，血清中这些物质的含量远远高于细胞生长需求，所以并不影响后续细胞培养效果，血清打开后分装使用，避免反复冻融可以降低出现沉淀的概率，遇到血清沉淀的情况我们可以尝试延长融解时间或者离心去除沉淀。
血清融解产生的沉淀（图片来源于网络，仅供学习使用）
此外血清在生产时经过多次过滤除菌，有些血清还经过辐照灭菌，所以在一般无需过滤。热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质，但是在胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要，补体的主要成分c3在胎牛血清中则几乎不能检出，其他的补体成分也很少。
细胞出现问题如何判断是否与血清有关？
主要看是否更换了新批次的血清，不同批次的血清成分可能有一定程度的改变，所以推荐购买血清时多囤几瓶同批次的，更换批次后，一定要注意观察细胞状态。
血清批间差会造成细胞哪些改变呢？
主要表现为增长变慢，细胞边界不清，形态改变，空泡化，贴壁能力减弱，漂浮，凋亡增多等。
血清批间差造成的细胞聚团、形态改变、空泡化
货号 品名 应用
abs981 胎牛血清（特级） 适合各类细胞，特别是干细胞、原代细胞等血清依赖度高的细胞
abs972 胎牛血清(优级) 适用于特异抗体要求较高产品、较贵细胞、种细胞培养与封闭
abs973 胎牛血清(优级),辐照 适用于特异抗体要求较高产品、较贵细胞、种细胞培养与封闭
abs974 胎牛血清(标准级) 适用于正常封闭与增殖旺盛的常规细胞系的培养
abs975 胎牛血清(标准级),辐照 适用于正常封闭与增殖旺盛的常规细胞系的培养等。
abs977 新生牛血清(特级) 适用于特异抗体要求较高产品、较贵细胞及活疫苗产品生产
abs978 新生牛血清(优级) 适用于细胞培养、疫苗产品生产、正常封闭等。
abs991 成牛血清(标准级) 适用于正常封闭和体外诊断试剂等。
上海优宁维生物科技股份有限公司
试剂 | 耗材 | 仪器 | 软件 | 定制 | 实验服务 | 供应链
微信公众平台：优宁维抗体专家，欢迎关注！
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水质检测仪检测自来水的标准
丹纳赫（Danaher）57亿美元收购Abcam
液相色谱法在临床生物样品分析及药代动力学研究
直流高压发生器产品性能
联合水务开启申购 A股上市渐行渐近
细胞养得好，血清有门道
研磨机研磨运动及皮带使用问题
GRK系列常压人孔选型标准
谈谈相机的Skipping 和 Binning 模式
布袋除尘器滤布的选用
克拉克VCM 5N3P1S流量计的故障分析
意大利UNIVER气动电磁阀性能
液相色谱仪特点及结构
供应ABC-HXC-100带变压器三项电源指示灯
烟囱折梯安装维修案例
随着智能技术的发展数显拉力试验机配置也在
无机纤维喷涂棉施工和维护
VOC废气处理技术工艺详解
体积\表面电阻率测定仪使用时有哪些注意事项？
小型开炼机的安全性能靠什么来保证
1.血清为何对细胞状态影响如此之大？
2.血清到底如何挑选？
3.絮状物、沉淀、过滤、灭活等使用常见问题？
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血清为何对细胞状态影响如此之大？
血清中含有多种已知和未知的成分，主要包括：蛋白质和多态、多种因子、氨基酸 、激素，其他微量元素及不确定成分。其中生长因子促进细胞增值，附着因子促进细胞贴壁并具有抗胰酶活性，各种蛋白质可提供细胞生长所必需的营养物质，矿物质、脂类及激素也可以结合于血清的蛋白质中，由此可见血清在细胞培养过程中十分关键，其本身存在多种未知成分，采血时间差异，批次之间差异等，综合决定了血清对细胞状态的影响程度。
根据动物来源不同，血清可分为马血清、牛血清、猪血清，还有羊、鸡、兔等动物来源的血清，根据采血时间、血缘品质又分为不同类别，加之不同工艺的加工，市面上可见的血清种类繁多。
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类别 来源
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依据《中国生物制品主要原辅料质控标准2000年版》
1.有害微生物，不能含有牛腹泻病毒，不能被噬菌体、支原体、真菌污染。
2.内毒素，不应高于10 eu/ml.
3.总蛋白含量，3.5%~5%（w/v），过高可能是由于采血时间较晚，过低血清可能被人为稀释。
4.血红蛋白，从一定程度上反映了采集流程的规范程度。不应高于0.02% (w/v).
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