抗人pirin单抗杂交瘤细胞;IIIA3bC1E12D1培养操作规程

抗人pirin单抗杂交瘤细胞;iiia3bc1e12d1培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)抗人pirin单抗杂交瘤细胞;iiia3bc1e12d1培养准备rpmi-1640培养基(rpmi-1640:gibco,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%dmso,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4ml培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1ml培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000rpm,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冻存条件:无血清冻存液
细胞描述:本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。
细胞备注: 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养
关键词:培养箱

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